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大腸菌群質(zhì)控樣品/GB/T 18204.4-2013 公共場所衛(wèi)生檢驗方法第4部分：公共用品用具微生物

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CICC

定性/陽性

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公共場所大腸菌群檢驗質(zhì)量控制與人員考核,。

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適用范圍	適用于各類食品中大腸菌群的測定,，包括加工食品、原料及食品接觸表面的微生物學(xué)檢驗[5],。

核心檢測方法

采用三步法（初發(fā)酵、分離培養(yǎng),、復(fù)發(fā)酵）,，利用乳糖膽鹽發(fā)酵管和VRBA培養(yǎng)基，通過產(chǎn)酸產(chǎn)氣現(xiàn)象確認(rèn)結(jié)果[5],。

檢出限與定量限

MPN法檢出限為3 MPN/g（mL）,，定量范圍根據(jù)稀釋梯度覆蓋10?~10? CFU/g[5]。

質(zhì)控樣品要求

需定期使用陽性對照菌株（如大腸埃希氏菌ATCC 25922）驗證培養(yǎng)基有效性,，空白對照須無菌生長[5],。

關(guān)鍵實驗步驟

1. 樣品均質(zhì)與梯度稀釋；2. 初發(fā)酵（36±1℃培養(yǎng)24±2h）,；3. 劃線分離與復(fù)發(fā)酵確認(rèn),；4. 結(jié)果計算采用MPN檢索表[5]。

特別說明	若樣品含抑菌成分需進(jìn)行中和處理,，產(chǎn)氣量不足時可延長培養(yǎng)至48h,，蔓延菌落需通過覆蓋瓊脂層控制[5]。

適用范圍	針對食品接觸材料及制品（如餐具,、容器）的大腸菌群檢測,，規(guī)定消毒后產(chǎn)品的衛(wèi)生指標(biāo)[4]。

核心檢測方法

采用涂抹法采樣,，接種乳糖膽鹽發(fā)酵管,，44.5℃±0.5℃水浴培養(yǎng)24h，觀察產(chǎn)氣情況[4],。

檢出限與定量限

定性檢測要求不得檢出/50cm2,，定量法檢出限為1 CFU/cm2[4]。

質(zhì)控樣品要求

采樣需覆蓋材料表面100cm2,，樣品運輸需在4h內(nèi)完成檢測,，防止交叉污染[4]。

關(guān)鍵實驗步驟

1. 無菌棉拭子涂抹采樣,；2. 接種后雙層封管防止污染,；3. 精確控制水浴溫度與時間[4]。

特別說明	檢測結(jié)果若呈陽性需復(fù)核,，并追溯生產(chǎn)環(huán)節(jié)的消毒工藝,，重復(fù)檢測仍陽性則判定產(chǎn)品不合格[4],。

[4] GB 14934-2016 標(biāo)準(zhǔn)中的大腸菌群檢測詳解 [5] GB 4789.3-2016:食品微生物學(xué)檢驗大腸菌群測定的詳解

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