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PCFA培養(yǎng)基/用于唐菖蒲伯克霍爾德氏菌分離培養(yǎng)（GB4789.29/GB4789）

HB9140

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250g

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PCFA培養(yǎng)基介紹：

用途：用于唐菖蒲伯克霍爾德氏菌分離培養(yǎng),。

實驗原理：

氯化銨提供氮源,；衛(wèi)矛醇提供碳源；葡萄糖為可發(fā)酵糖類,；磷酸氫二鉀和磷酸二氫鈉是緩沖劑,；氯化鈉維持細(xì)胞滲透壓；氯化鈣,、硫酸鎂和硫酸亞鐵提供微量元素,；瓊脂是凝固劑。配套加入的PCFA添加劑能抑制大部分革蘭氏陽性菌的生長,。

添加劑：每200ml培養(yǎng)基中加入1支HB9140a?PCFA培養(yǎng)基添加劑,，每支添加于200mlPCFA培養(yǎng)基。

成分（g/L）

氯化銨	1.0
磷酸二氫鉀	1.14
磷酸氫二鈉	0.7
氯化鈉	4.0
氯化鈣	0.005
七水硫酸鎂	0.2
七水硫酸亞鐵	0.0005
脫氨酸	0.01
葡萄糖	0.05
衛(wèi)矛醇	15.0
瓊脂	12.0
pH值7.0±0.1	25℃

用法：

稱取本品34.0g,，加熱煮沸完全溶解于1000ml蒸餾水中,，分裝三角瓶，每瓶200ml，115℃高壓滅菌15分鐘,，冷至50℃左右時,，每200ml培養(yǎng)基中加入1支PCFA培養(yǎng)基添加劑，混勻,，傾入無菌平皿,，備用。

注：培養(yǎng)基中含少量硫酸鎂及其他無機(jī)鹽,，滅菌后可能出現(xiàn)少量沉淀,。

唐菖蒲伯克霍爾德氏菌在PCFA培養(yǎng)基上生長特征：

灰白色菌落光滑濕潤，邊緣整齊

PCFA培養(yǎng)基微生物靈敏度試驗：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置36℃需氧培養(yǎng)48小時。

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一,、適用范圍

適用于食品、環(huán)境樣本中唐菖蒲伯克霍爾德氏菌（椰毒假單胞菌酵米面亞種）的選擇性分離培養(yǎng),，特別針對其毒素產(chǎn)生菌株的檢測[2],。

二、核心檢測方法

基于選擇性培養(yǎng)基原理,，通過硫酸和林肯霉素抑制非目標(biāo)菌生長,，結(jié)合培養(yǎng)基基礎(chǔ)成分促進(jìn)目標(biāo)菌特征性菌落形成。培養(yǎng)條件為36±1℃需氧環(huán)境,，持續(xù)24~48小時[2],。

三、檢出限與定量限

最低檢出限為1CFU/g（針對固體樣本）,，定量限通過生長率PR≥0.5判定,。大腸埃希氏菌等干擾菌的抑制率需達(dá)到G≤1級別[2]。

四,、質(zhì)控樣品要求

陽性對照：唐菖蒲伯克霍爾德氏菌CICC10574應(yīng)呈現(xiàn)灰白色光滑菌落,；陰性對照：大腸埃希氏菌CMCC44102和糞腸球菌ATCC29212不得生長[2]。

五,、關(guān)鍵實驗步驟

1. 無菌條件下開啟試劑鋁蓋,，用1mL無菌生理鹽水溶解添加劑
2. 將溶解液加入50℃預(yù)熱的100mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基中混勻
3. 傾注平板后30分鐘內(nèi)完成接種操作[2]

六,、特別說明

試劑貯存需嚴(yán)格保持2~8℃，開封后需立即使用,。培養(yǎng)基配制后應(yīng)在4小時內(nèi)使用,，超過時效可能導(dǎo)致選擇性成分失效[2]。

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