釀膿鏈球菌Streptococcus pyogenesCICC 10356(GB 1886.174-2016/GB 4789.43-2016)
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Lentibacillus populi
DSM 101738 |
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變形菌屬Proteus sp/CICC 10645
CICC 10645 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2570
CICC 2570 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2571
CICC 2571 | 見證書
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Dothidea sp/CICC 33502
CICC 33502 | 見證書
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Dothidea sp/CICC 33508
CICC 33508 | 見證書
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Lentibacillus populi
DSM 101738 |
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變形菌屬Proteus sp/CICC 10645
CICC 10645 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2570
CICC 2570 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2571
CICC 2571 | 見證書
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Dothidea sp/CICC 33502
CICC 33502 | 見證書
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肺炎鏈球菌
BNCC385402 | 見詳情
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本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中β型溶血性鏈球菌(包括釀膿鏈球菌)的定性檢測,覆蓋食品生產(chǎn)、加工及流通環(huán)節(jié)的微生物安全控制[7][9]。
采用選擇性培養(yǎng)基(血瓊脂平板)分離結(jié)合生化鑒定(桿菌肽敏感性試驗、PYR試驗)確認(rèn)目標(biāo)菌株。
最低檢出限為1 CFU/25g樣品;定量檢測需通過梯度稀釋法實現(xiàn)。
需同步進(jìn)行陽性對照(ATCC 19615標(biāo)準(zhǔn)菌株)及陰性對照試驗,培養(yǎng)基每批次需驗證溶血特性。
1. 樣品前處理(均質(zhì)與增菌)
2. 選擇性培養(yǎng)(35℃±1℃, 18-24h)
3. 典型菌落分離與純化
4. 生化鑒定與血清學(xué)分型
實驗人員需具備BSL-2級生物安全防護資質(zhì),疑似陽性樣品需經(jīng)省級以上CDC復(fù)核確認(rèn)。
針對食品工業(yè)用酶制劑中釀膿鏈球菌等微生物污染的風(fēng)險評估,規(guī)定抗菌活性檢測閾值[7]。
采用瓊脂擴散法測定抑菌圈直徑,結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)菌株(CMCC 32213)進(jìn)行活性比對。
可檢測≥5mm的抑菌圈,定量活性單位為IU/mg(國際單位/毫克)。
每批次實驗需包含空白對照(無菌生理鹽水)及標(biāo)準(zhǔn)品對照(已知活性酶制劑)。
1. 菌懸液制備(0.5麥?zhǔn)蠞岫龋?br/>2. 雙層瓊脂傾注法
3. 恒溫培養(yǎng)(35℃, 24h)
4. 抑菌圈測量與結(jié)果判定
需注意酶制劑的pH穩(wěn)定性,實驗環(huán)境溫度波動需控制在±1℃范圍內(nèi)。
規(guī)范出口食品中釀膿鏈球菌的分子分型流程,適用于溯源分析與疫情暴發(fā)調(diào)查[3][6]。
基于多位點序列分型(MLST),測定7個管家基因(如gki、gtr等)的核苷酸序列。
DNA提取濃度需≥10ng/μL,PCR擴增效率要求≥90%。
需包含國際標(biāo)準(zhǔn)菌株(如ATCC 12344)作為分型參照,每批次實驗設(shè)置陰性對照。
1. 細(xì)菌基因組DNA提取
2. 靶基因PCR擴增與純化
3. 雙向測序與序列拼接
4. 等位基因譜比對分析
實驗室需通過CNAS分子生物學(xué)檢測能力認(rèn)證,原始數(shù)據(jù)需保存10年以上。
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