霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)/用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn)(GB093/GB097/GB145)
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用途:用于霍亂弧菌的生化試驗(yàn),。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
牛肉浸粉,、酵母浸粉,、?蛋白胨、蛋白胨提供氮源,、維生素和礦物質(zhì),;乳糖、葡萄糖是可發(fā)酵的糖,;氯化鈉維持均衡的滲透壓,;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑,。
用法:
稱取本品64.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,,分裝于試管內(nèi)的3/4左右高度,,121℃高壓滅菌15分鐘,放置高層斜面,,備用,。
注:培養(yǎng)基中含少量硫酸亞鐵,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀,。
霍亂雙糖鐵瓊脂質(zhì)控結(jié)果:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果現(xiàn)象與說(shuō)明:
1.霍亂弧菌非01群,、副溶血性弧菌、溶藻弧菌斜面紅/底層黃:發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖,,是不發(fā)酵乳糖的特征的菌類,。2.大腸埃希氏菌斜面黃/底層黃:既發(fā)酵乳糖也發(fā)酵葡萄糖,產(chǎn)生大量的酸使整個(gè)培養(yǎng)基呈黃色,,同時(shí)有產(chǎn)氣現(xiàn)象,。3.鼠傷寒沙門(mén)氏菌、普通變形桿菌斜面紅/底層黃(部分區(qū)域黑色):發(fā)酵葡萄糖但不發(fā)酵乳糖同時(shí)產(chǎn)生硫化氫,,是產(chǎn)硫化氫不發(fā)酵乳糖特征,。硫化氫的產(chǎn)生:這類菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,,硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵沉淀,。
霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,,放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),。?
以上信息僅供參考,請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn),!
一,、適用范圍
二,、核心檢測(cè)方法
2. 硫化氫檢測(cè):通過(guò)硫酸亞鐵與硫化氫反應(yīng)生成黑色沉淀判斷,;
3. 動(dòng)力觀察:穿刺接種后,,沿穿刺線擴(kuò)散表示有動(dòng)力[9][10]。
三,、檢出限與定量限
2. 定量限:需結(jié)合菌落計(jì)數(shù)法,,選擇30-100個(gè)菌落的稀釋級(jí)進(jìn)行定量分析[1][6],。
四、質(zhì)控樣品要求
2. 陰性對(duì)照:未接種培養(yǎng)基保持紅色;
3. 質(zhì)控頻率:每批次培養(yǎng)基需進(jìn)行質(zhì)控試驗(yàn)[9][6],。
五,、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
2. 接種方法:穿刺底層并劃線斜面;
3. 培養(yǎng)條件:36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),;
4. 結(jié)果判讀:斜面顏色變化優(yōu)先于底層觀察[9][5],。
六、特別說(shuō)明
2. 硫化氫假陽(yáng)性:過(guò)量接種可能導(dǎo)致非特異性反應(yīng),;
3. 培養(yǎng)基保存:開(kāi)封后需密封防潮,保質(zhì)期3年[9][3],。
以上信息僅供參考,,請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)!