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副溶血性弧菌瓊脂/用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB093/GB097/GB145）

HB4184

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250g

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副溶血性弧菌瓊脂介紹：

用途：用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng),。

成分（g/L）

蛋白胨酵母浸粉牛膽鹽硫代硫酸鈉氯化鈉十六烷基硫酸鈉檸檬酸鈉蔗糖溴麝香草酚蘭麝香草酚蘭瓊脂pH值8.6±0.1

10.05.05.010.020.00.210.020.00.040.0420.025℃

檢驗原理：

蛋白胨、酵母浸粉提供碳氮源,、維生素和生長因子,；氯化鈉可刺激弧菌的生長；蔗糖是可發(fā)酵的糖類,；牛膽鹽、硫代硫酸鈉,、檸檬酸鈉及較高的pH可抑制革蘭氏陽性菌和大腸菌群,；霍亂弧菌對酸性環(huán)境比較敏感，因此該pH值可增強(qiáng)其生長,；溴麝香草酚蘭和麝香草酚蘭是pH指示劑,；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

用法：

稱取本品100.28g,，加熱煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,，冷至45-50℃左右時,，傾入無菌平皿。

副溶血性弧菌瓊脂微生物質(zhì)控結(jié)果：

a：溶藻弧菌,，b：霍亂弧菌（海水）,，c：非O1群霍亂弧菌，d：河流弧菌,，e：創(chuàng)傷弧菌,，f：副溶血性弧菌

副溶血性弧菌瓊脂微生物靈敏度試驗：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株,，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時,。

副溶血性弧菌瓊脂相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說明及用途
HB4134-2	四號瓊脂培養(yǎng)基（醫(yī)療）NO.4 Agar Medium	250g	用于人體糞便樣品中腸道致病性弧菌、霍亂弧菌的分離培養(yǎng),，不具有微生物鑒別和藥敏鑒別的作用
HB4133-4	慶大霉素瓊脂培養(yǎng)基（醫(yī)療）Gentamycin Agar Medium	250g	用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng),，不具有微生物鑒別和藥敏鑒別的作用
HB8623	糖類分解試驗用培養(yǎng)基	250g	該培養(yǎng)基用于副溶血性弧菌的糖類分解試驗
HB4129	堿性蛋白胨水Alkaline Peptone Broth	250g	用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB4130	TCBS瓊脂Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Agar	250g	用于致病性弧菌的選擇性分離
HB4131	氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB)Sodium Chloride Polymyxin Broth Base	250g	用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)，用前應(yīng)無菌加入多粘菌素B（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4131a	多粘菌素B（2.5萬單位）Polymyxin B	2.5萬單位/支*5	每支添加于100ml氯化鈉多粘菌素B肉湯基礎(chǔ)（SCPB）中
HB4133-2	慶大霉素瓊脂Gentamycin Agar	250g	用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4135	我妻氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)Wagstsuma Agar Base	250g	用于副溶血性弧菌神奈川現(xiàn)象試驗
HB4136	60g/L氯化鈉蛋白胨肉湯（SN標(biāo)準(zhǔn)）60g/L NaCl Peptone Water	250g	用于副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4088-8	氯化鈉三糖鐵瓊脂NaCl Triple Sugar Iron Agar	250g	用于弧菌的生化試驗
HB4138	胰胨大豆瓊脂斜面(TSA)(副弧專用)Tryptic Soy Agar Slant	250g	用于培養(yǎng)副溶血性弧菌,，做細(xì)胞色素氧化酶實驗（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4139	42℃生長培養(yǎng)基42℃ Growth Medium	250g	用于副溶血性弧菌42℃生長試驗
HB4140	O/F試驗用培養(yǎng)基(HLGB)Hugh-Leifon Glucose Broth	250g	用于鑒別弧菌葡萄糖代謝類型（發(fā)酵型或氧化型）（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4141	氯化鈉結(jié)晶紫增菌液Sodium Chloride Violet purple Enrichment	250g	用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4142	氯化鈉蔗糖瓊脂Sodium Chloride Sucrose Agar	250g	用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
HB4143	嗜鹽菌選擇性瓊脂Halophilic Bacteria Selective Agar	250g	用于副溶血性弧菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4144	氯化鈉血瓊脂基礎(chǔ)Sodium Chloride Blood Agar Base	250g	用于副溶血性弧菌的溶血試驗（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4145	霍亂雙糖鐵瓊脂(KIA)Kligler Iron Agar	250g	用于霍亂弧菌的生化試驗
HB4146	T1N1瓊脂T1N1 Agar	250g	用于霍亂弧菌的培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4147	T1N0肉湯TIN0 Broth	250g	用于霍亂弧菌的生長試驗
HB4148	T1N3肉湯T1N3 Broth	250g	用于弧菌的生長試驗（GB,、SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4149	精氨酸葡萄糖斜面瓊脂（AGS）Arginine-Glucose Slant	100g	用于霍亂弧菌的復(fù)合生化試驗
HBPM4133-4	慶大霉素瓊脂培養(yǎng)基平板（醫(yī)療）（9cm）	9cm*10個/包	用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)，不具有微生物鑒別和藥敏鑒別的作用
HBPM4134-2	四號瓊脂培養(yǎng)基平板（9cm）（醫(yī)療）	9cm*10個/包	用于人體糞便樣品中腸道致病性弧菌,、霍亂弧菌的分離培養(yǎng),，不具有微生物鑒別和藥敏鑒別的作用
HBPM9301	硫檸膽蔗瓊脂培養(yǎng)基平板（TCBS瓊脂培養(yǎng)基）（醫(yī)療）（9cm）	9cm*10個/包	用于霍亂弧菌、副溶血性弧菌的分離培養(yǎng),，不具有微生物鑒別和藥敏鑒別作用
HB4185	副溶血性弧菌增菌液Vibrio parahaemolyticus Broth	250g	用于副溶血性弧菌的增菌培養(yǎng)
HB4129-1	3%氯化鈉堿性蛋白胨水3%NaCl Alkaline Peptone Water	250g	用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB8631	3%氯化鈉胰蛋白胨大豆瓊脂3% NaCl Tryptic Soy Agar	250g	用于副溶血性弧菌的純化培養(yǎng)和血清學(xué)試驗時增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4088-3	3%氯化鈉三糖鐵(TSI)瓊脂3%TSI Agar	250g	用于副溶血性弧菌的三糖生化試驗
GS018	3%氯化鈉賴氨酸脫羧酶	20支	用于副溶血性弧菌賴氨酸脫羧酶試驗
GB093	3%氯化鈉MR-VP培養(yǎng)基3% NaCl MR-VP Medium	20支	用于副溶血性弧菌的甲基紅和V-P試驗
GB097	3%NaCl ONPG	20支	用于副溶血性弧菌的創(chuàng)傷
GB145	霍亂紅胨水	20支	霍亂弧菌的霍亂紅試驗
HB8700	BTB培養(yǎng)基BTB,，Medium	250g	用于弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB0101-6	PAC斜面培養(yǎng)基PAC Medium Slant	250g	用于弧菌的保存
HB4134	四號瓊脂No.4 Agar Base	250g	用于霍亂弧菌的選擇性分離培養(yǎng)
HB8416	嗜鹽性試驗用胰胨水Halophilic experimental medium	250g	用于弧菌的嗜鹽試驗
SHBG02-1	副溶血性弧菌成套生化鑒定管（HRGB）	10種2套/盒5盒	用于副溶血性弧菌的生化鑒定
HB8278	革蘭氏染色液試劑盒Gram Stain Kit	5ml*8	用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗
HB8281	V-P試劑盒Voges-Proskauer Reagent	5ml*4	用于V-P試驗
HB0109-9	氯化鈉營養(yǎng)瓊脂NaCl Nutrient Agar	250g	用于霍亂弧菌傳代培養(yǎng)或純化培養(yǎng)
HBPT019	3%NaCl堿性蛋白胨水管（9ml）	9ml*20支/盒	用于副溶血性弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB8809	慶大霉素（100IU）和亞碲酸鉀（1mg）混合液	1ml*5支/盒	用于分離培養(yǎng)霍亂弧菌抑菌劑
HB4129-4	堿性蛋白胨水Alkaline Peptone Broth	250g	用于弧菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB8624	靛基質(zhì)試驗用培養(yǎng)基Indole Test Medium	250g	用于副溶血弧菌的靛基質(zhì)試驗
HB4133-2	慶大霉素瓊脂Gentamycin Agar	250g	用于霍亂弧菌的分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4130-1	TCBS肉湯Thiosulfate Citrate Bile Salts Sucrose Broth	250g	用于致病性弧菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB4129-6	堿性蛋白胨水（ASPW）（ISO21872-1：2017）Alkaline Saline Peptone Water	250g	用于弧菌選擇性增菌培養(yǎng)（ISO21872-1：2017海產(chǎn)品弧菌檢驗）

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一,、適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于水產(chǎn)品及食物中毒樣品中副溶血性弧菌的定性及定量檢測，包括新鮮,、冷藏,、冷凍的海水或淡水魚類、甲殼類,、貝殼類和軟體動物等生食水產(chǎn)品,。其他食品可參照執(zhí)行[1]。

二,、核心檢測方法

1. 增菌培養(yǎng)：使用3%氯化鈉堿性蛋白胨水（APW）36℃±1℃增菌8-18小時[1][5]
2. 分離培養(yǎng)：采用TCBS瓊脂或顯色培養(yǎng)基進(jìn)行選擇性分離,，37℃培養(yǎng)18-24小時[5][6]
3. 生化鑒定：包括氧化酶試驗、TSI斜面反應(yīng),、嗜鹽性試驗及溶血性試驗[1][6]

三,、檢出限與定量限

定性檢測靈敏度為1CFU/25g樣品，定量檢測范圍102-10?CFU/g。冷凍樣品需延長增菌時間至24小時以提高檢出率[1][5],。

四,、質(zhì)控樣品要求

每批次實驗應(yīng)包含：
1. 陽性對照：ATCC 17802標(biāo)準(zhǔn)菌株
2. 陰性對照：非弧菌屬菌株
3. 空白對照：無菌生理鹽水
質(zhì)控菌株需在TCBS瓊脂上呈現(xiàn)典型藍(lán)綠色菌落[5][6]

五、關(guān)鍵實驗步驟

1. 樣品處理：25g樣品加225mL滅菌生理鹽水均質(zhì),，制備1:10稀釋液[1][5]
2. 選擇性分離：TCBS瓊脂劃線需間隔3mm以上,，避免菌落融合[5]
3. 純化培養(yǎng)：挑取可疑菌落至TSA-TTC培養(yǎng)基觀察動力及純度[6]
4. 確證試驗：需完成7項關(guān)鍵生化試驗（包括ONPG、MR-VP等）[6]

六,、特別說明

1. 需在生物安全二級實驗室操作,，處理含溶血毒素菌株時需加強(qiáng)防護(hù)[1]
2. 夏季樣品需4小時內(nèi)完成前處理，冬季不超過6小時[5]
3. 對亞硝酸鹽敏感樣品需采用改良APW增菌液[6]

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