霍亂紅胨水/霍亂弧菌的霍亂紅試驗(yàn)（GB145）
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產(chǎn)品用途：霍亂弧菌的霍亂紅試驗(yàn),。
產(chǎn)品用法：加熱溶解,，121℃高壓滅菌15min。
質(zhì)量控制方法：霍亂弧菌,、副溶血性弧菌,、大腸桿菌。
結(jié)果判斷：
?編號(hào)
?產(chǎn)品名稱
?結(jié)果判斷
?培養(yǎng)時(shí)間?
備注?
?陽性
陰性?
GB145
霍亂紅胨水
紅色
無色
18-24
培養(yǎng)后加入濃硫酸2～3滴,，觀察結(jié)果
霍亂紅胨水微生物靈敏度試驗(yàn):
接種以下質(zhì)控菌株,，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),。
以上信息僅供參考，請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn),！
T/PSC 1.5-2022 船舶壓載水檢測(cè)方法 第5部分：霍亂弧菌
適用范圍：本標(biāo)準(zhǔn)適用于船舶壓載水中霍亂弧菌的檢測(cè),，包括樣品前處理、菌株分離及毒力基因鑒定[7],。
核心檢測(cè)方法：采用硫代硫酸鹽檸檬酸鹽膽鹽蔗糖瓊脂培養(yǎng)基（TCBS）和弧菌顯色培養(yǎng)基進(jìn)行分離純化,，結(jié)合生化鑒定與分子生物學(xué)方法確認(rèn)[7]。
檢出限與定量限：檢測(cè)靈敏度為10 CFU/100mL,，定量范圍10^1-10^5 CFU/mL,，滿足IMO D-2排放標(biāo)準(zhǔn)要求[7]。
質(zhì)控樣品要求：每批次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陽性對(duì)照（ATCC 14035霍亂弧菌菌株）和環(huán)境陰性對(duì)照（滅菌海水樣品）[7],。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 堿性蛋白胨水增菌培養(yǎng)（37℃±1℃,，6-8小時(shí)）
2. TCBS培養(yǎng)基劃線分離（37℃±1℃，18-24小時(shí)）
3. 氧化酶試驗(yàn)及黏絲試驗(yàn)初篩
4. ctxA基因PCR擴(kuò)增確認(rèn)[7]
特別說明：需在BSL-2實(shí)驗(yàn)室操作,，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)結(jié)合國(guó)際海事組織《壓載水管理公約》要求進(jìn)行判定[7],。
微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室霍亂弧菌檢測(cè)通用要求
適用范圍：臨床及環(huán)境樣本中霍亂弧菌的分離鑒定，特別適用于O1和O139血清型檢測(cè)[8],。
核心檢測(cè)方法：通過堿性蛋白胨水增菌后,，采用TCBS瓊脂平板培養(yǎng)結(jié)合生化反應(yīng)（霍亂紅試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)等）完成鑒定[8],。
檢出限與定量限：最低檢出限為1 CFU/g（糞便樣本）,，增菌后可提高靈敏度至0.1 CFU/g[8]。
質(zhì)控樣品要求：每批次需包含已知陽性菌株（如ATCC 39315）和空白培養(yǎng)基對(duì)照[8],。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟：
1. 樣本預(yù)處理（pH9.0堿性蛋白胨水震蕩混勻）
2. 增菌培養(yǎng)（37℃±1℃,，6-8小時(shí)）
3. 選擇性培養(yǎng)基劃線（TCBS/雙氫鏈霉素洗衣粉瓊脂）
4. 生化鑒定（賴氨酸脫羧酶、硝酸鹽還原等7項(xiàng)指標(biāo)）[8]
特別說明：O1血清群確診需同時(shí)滿足：典型菌落形態(tài),、動(dòng)力陽性,、生化特性符合及血清凝集試驗(yàn)陽性[8]。
以上信息僅供參考,，請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn),！