綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基管（PDP）13ml/用于銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn)
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用途：用于銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）的綠膿菌素測(cè)定試驗(yàn),。
包裝方式：玻璃管裝13ml，螺旋口,，單支獨(dú)立包裝,，更防漏，免污染?
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理：
蛋白胨和甘油提供碳氮源,；氯化鎂和硫酸鉀促進(jìn)綠膿色素和熒光素的產(chǎn)生,；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
使用說(shuō)明：
用接種針（環(huán)）挑取待測(cè)菌落,，在PDP斜面上“之”字形劃線接種,，置于36±1℃培養(yǎng)24±2h或標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束后,，向試管中加入3-5mL三氯甲烷,，,充分振蕩使培養(yǎng)物中的綠膿菌素溶解于三氯甲烷液內(nèi)，待三氯甲烷提取液呈藍(lán)色時(shí),，用吸管將三氯甲烷移到另一試管中并加入1mol/L的鹽酸1mL左右,，振蕩后，靜置片刻,。如上層鹽酸液內(nèi)出現(xiàn)粉紅色到紫紅色時(shí),，即綠膿菌素試驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性。
綠膿菌素生成試驗(yàn)方法及原理：
方法：挑取可疑菌落接種在在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基（PDP）斜面上,，培養(yǎng)24小時(shí),，觀察斜面有無(wú)色素。如有色素,，在試管內(nèi)加氯仿3.0～5.0mL,，充分震搖，使培養(yǎng)物中的綠膿菌素提取在氯仿中,，待氯仿提取液呈現(xiàn)綠色時(shí),，加1mol/L鹽酸約1mL,，震搖后靜置片刻，上層鹽酸溶液中呈現(xiàn)粉紅至紅色實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽(yáng)性,，否則為陰性,。
原理：銅綠假單胞菌能產(chǎn)生的綠膿菌素能被氯仿提取，且在水中溶解度比氯仿大,，并且會(huì)發(fā)生可逆的氧化還原反應(yīng),，氧化時(shí)堿性呈藍(lán)色，酸性呈紅色,。所以加入鹽酸溶液并震搖后,，綠膿菌素會(huì)由氯仿轉(zhuǎn)移至鹽酸溶液中，并在酸性環(huán)境中呈紅色,。
注意事項(xiàng)：
1.使用前應(yīng)觀察培養(yǎng)基外觀是否正常,，若出現(xiàn)試管破碎、培養(yǎng)基變色,、干裂或污染等異?，F(xiàn)象時(shí)，則不能使用,。
2.本產(chǎn)品為保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性及無(wú)菌性,，采用了密封的螺旋試管蓋。在接種培養(yǎng)過(guò)程中,，嚴(yán)禁擰緊試管蓋,，建議更換為透氣的硅膠塞或者使用脫脂棉封口，保證良好的透氣性,。銅綠假單胞菌為嚴(yán)格需氧型細(xì)菌,，密閉培養(yǎng)會(huì)導(dǎo)致綠膿菌素產(chǎn)生不足，出現(xiàn)假陰性結(jié)果,。
3.使用三氯甲烷提取綠膿菌素時(shí),，通常浸泡5-10min即可，若效果不明顯,，也可延長(zhǎng)浸泡時(shí)間或用玻璃棒搗碎培養(yǎng)基斜面后浸泡,。
4.三氯甲烷為管制品，具有一定的危險(xiǎn)性,，且易揮發(fā),，提取綠膿菌素時(shí)應(yīng)在通風(fēng)櫥操作，做好防護(hù)措施,。同時(shí)由于三氯甲烷可溶解塑料,，因此操作時(shí)應(yīng)使用玻璃材質(zhì)的吸管和試管對(duì)三氯甲烷進(jìn)行轉(zhuǎn)移和存放,。
不同細(xì)菌在綠膿菌素測(cè)定用培養(yǎng)基管（PDP）中的生化反應(yīng)：
綠膿菌素測(cè)定培養(yǎng)基管(PDP）微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置35℃需氧培養(yǎng)24小時(shí)。
以上信息僅供參考,，請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn)！
一,、適用范圍
二、核心檢測(cè)方法
2. 選擇性分離：劃線接種至PDP培養(yǎng)基或十六烷基三甲基溴化銨平板,；
3. 生化鑒定：包括氧化酶試驗(yàn)、綠膿菌素測(cè)定,、硝酸鹽還原試驗(yàn)及42℃生長(zhǎng)試驗(yàn)[4][7][8],。
三、檢出限與定量限
定量限（LOQ）：與檢出限一致,，需通過(guò)陽(yáng)性對(duì)照驗(yàn)證[4][8]。
四,、質(zhì)控樣品要求
2. 陰性對(duì)照：非目標(biāo)菌（如大腸桿菌）；
3. 培養(yǎng)基質(zhì)控：每批次需驗(yàn)證無(wú)菌性及促生長(zhǎng)能力[3][8],。
五,、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
2. 綠膿菌素提取：菌落經(jīng)氯仿萃取后加入鹽酸觀察顯色反應(yīng),；
3. 結(jié)果判讀：紫紅色為陽(yáng)性,，需結(jié)合其他生化試驗(yàn)綜合判定[4][7][8]。
六,、特別說(shuō)明
2. 培養(yǎng)基保存：避光干燥存放，開(kāi)封后需密封防潮,；
3. 實(shí)驗(yàn)安全：操作人員需穿戴防護(hù)裝備,，實(shí)驗(yàn)室需符合生物安全二級(jí)（BSL-2）標(biāo)準(zhǔn)[3][4][6]。
以上信息僅供參考,，請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn),！