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綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(USP標準)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)/用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗_
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綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(USP標準)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)/用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗

HB5187-2 Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin {{goodObj.price > 0 ? '￥' + goodObj.price : '咨詢'}} ￥{{goodObj.sell_price || 0}} 咨詢 250g {{goodObj.date}} hopebio {{item.norm}} 見證書 {{inventory}}
綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(USP標準)(Pseudomonas Agar Medium for Detection of Pyocyanin)介紹：

用途：用于綠膿桿菌的綠膿菌素測定試驗。

成分(g/L)

Pancreatic Digest of Gelatin/明膠蛋白胨?20.0
Anhydrous Magnesium Chloride/氯化鎂?1.4
Anhydrous Potassium Sulfate/硫酸鉀?10.0
Agar/瓊脂?15.0
pH值7.2 ± 0.2?25℃

檢驗原理：蛋白胨和甘油提供碳氮源；氯化鎂和硫酸鉀促進綠膿色素和熒光素的產生；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

用法：

Suspend 46.4g of the medium in one? liter of purified water containing10g?of glycerol.? Heat , with? frequent?agitation, and boil for 1 minute.?Autoclave 15 min? at? 121°C.?稱取本品 46.4g,另稱取 10g甘油,加熱煮沸溶解于1000ml純化水中,分裝 ,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。

注：培養(yǎng)基中含少量氯化鎂，滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。

綠膿菌素生成試驗方法及原理：

方法：挑取可疑菌落接種在在綠膿菌素測定用培養(yǎng)基（PDP）斜面上，培養(yǎng)24小時，觀察斜面有無色素。如有色素，在試管內加氯仿3.0～5.0mL，充分震搖，使培養(yǎng)物中的綠膿菌素提取在氯仿中，待氯仿提取液呈現(xiàn)綠色時，加1mol/L鹽酸約1mL，震搖后靜置片刻，上層鹽酸溶液中呈現(xiàn)粉紅至紅色實驗結果為陽性，否則為陰性。

原理：銅綠假單胞菌能產生的綠膿菌素能被氯仿提取，且在水中溶解度比氯仿大，并且會發(fā)生可逆的氧化還原反應，氧化時堿性呈藍色，酸性呈紅色。所以加入鹽酸溶液并震搖后，綠膿菌素會由氯仿轉移至鹽酸溶液中，并在酸性環(huán)境中呈紅色。

綠膿菌素測定用培養(yǎng)基中細菌的生長特征：

綠膿菌素測定（PDP）試驗流程及現(xiàn)象：

綠膿菌素測定（PDP）試驗操作視頻：

綠膿菌素測定用培養(yǎng)基(USP)微生物靈敏度試驗:

按標簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時。

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    綠膿菌素測定用培養(yǎng)基（USP標準）解讀
    適用范圍 用于鑒別銅綠假單胞菌（綠膿桿菌）產生綠膿菌素的檢測試驗，適用于藥品、化妝品及醫(yī)療器械等微生物檢驗領域[7]。
    核心檢測方法 采用斜面培養(yǎng)法：將樣品接種于培養(yǎng)基后，30-35℃培養(yǎng)24小時，通過觀察培養(yǎng)基顏色變化（變綠色）及氯仿抽提液顯色反應進行判定[7]。
    檢出限與定量限 可特異性檢測銅綠假單胞菌產生的綠膿菌素，靈敏度滿足USP要求，陽性菌株培養(yǎng)后可見典型綠色色素擴散[7]。
    質控樣品要求 需使用銅綠假單胞菌CMCC10104作為陽性對照，應生長良好且顯色符合標準；陰性對照不得出現(xiàn)干擾性顯色反應[7]。
    關鍵實驗步驟 1. 培養(yǎng)基配制：每升水加45.4g干粉及10g甘油，煮沸溶解后分裝滅菌
    2. 接種：斜面凝固后劃線接種待測菌
    3. 培養(yǎng)：30-35℃培養(yǎng)24小時后觀察顯色
    4. 驗證：加氯仿抽提液進行顯色確認[7]
    特別說明 · 培養(yǎng)基含氯化鎂（1.4g/L）和硫酸鉀（10g/L）促進色素生成
    · pH需嚴格控制在7.3±0.1
    · 滅菌后需立即制成斜面以防成分降解[7]

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