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胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)/用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)（GB標(biāo)準(zhǔn)）（GB/T5750.12-2023/SN088）

HB0253-9

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胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)介紹：

用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)

添加劑：每瓶需配套添加 5盒 HB0253a D-環(huán)絲氨酸溶液?或 4g HB0254 D-環(huán)絲氨酸使用,，每支HB0253a添加于100mlTSC，每支HB0254添加于500mlTSC,。,。

成分(g/L)：

胰胨	15.0
大豆胨	5.0
酵母粉	5.0
焦亞硫酸鈉	1.0
檸檬酸鐵銨	1.0
瓊脂	15.0
pH值7.6?±?0.2	25℃

檢驗(yàn)原理：胰胨、大豆胨和酵母粉提供碳氮源,、維生素和生長(zhǎng)因子,；葡萄糖和乳糖為可發(fā)酵糖類提供碳源；焦亞硫酸鈉和檸檬酸鐵銨用于檢測(cè)硫化氫的產(chǎn)生,，使菌落中心呈黑色,；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；D-環(huán)絲氨酸抑制非梭菌的細(xì)菌,。

用法：

稱取本品47.0g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝于 500ml 燒瓶中,每瓶250ml,121℃高壓滅菌 15 分鐘,。冷至 50±1℃時(shí),每250ml 培養(yǎng)基中,加入過(guò)濾除菌的 0.5% D-環(huán)絲氨酸溶液 20ml,混勻,備用。

注：培養(yǎng)基中含少量檸檬酸鐵銨,，滅菌后可能出現(xiàn)微量黑色沉淀,，搖勻使用即可。

產(chǎn)氣莢膜梭菌在TSC上的生長(zhǎng)特征：

胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC) 微生物靈敏度試驗(yàn)：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置36±1℃厭氧培養(yǎng)20-24小時(shí)。

胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)同名產(chǎn)品推薦：

HBPM0253-9 胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂(TSC)平板（9cm） 9cm*10/包

HB0253 胰?-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)（TSC） 250g

胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說(shuō)明及用途
HB9203	ET發(fā)酵培養(yǎng)基ET Fermention Medium	250g	用于厭氧菌培養(yǎng)
HB0255	產(chǎn)芽孢肉湯Sporulation Broth	250g	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)基(SN標(biāo)準(zhǔn))
HB0256	亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base	250g	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))因標(biāo)準(zhǔn)更新,，停止生產(chǎn),，請(qǐng)采購(gòu)HB0256-2
HB0256a	多粘菌素B（1.2mg）Polymyxin B	1.2mg/支*5	每支添加于100ml SPS中
HB0258	多價(jià)蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基Polypeptone Yeast Extract Medium	250g	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌糖（醇）發(fā)酵的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
HB0259	庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)Cooked Meat Medium Base	250g	用于厭氧菌的增菌培養(yǎng)
HB0260	庖肉牛肉粒Dried Meat Particle	100g	加入HB0259 庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)中，配成庖肉培養(yǎng)基
HB5190	液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基Thiolglycollate Medium	250g	用于藥品,、生物制品無(wú)菌檢測(cè),，檢測(cè)好氧菌和厭氧菌（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB0262	卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)Egg Yolk Agar Base	250g	用于肉毒梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HBPT9260	TPGYT肉湯管（含無(wú)菌胰酶(1:250)溶液）（15ml）	15ml*20支/盒	用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)
HBJ8718	含50ml 明膠磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋Gelatin Phosphate Buffer	50ml*10	用于檢測(cè)肉毒梭菌時(shí)樣品稀釋液
HBPM9007-1	卵黃瓊脂培養(yǎng)基平板（9cm）(2-8℃)Egg Yolk Agar Medium	9cm*10	用于肉毒梭菌的分離培養(yǎng)
HBPT032-8	硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管（9ml）Thiolglycollate Medium	9ml*20/盒	用于藥品,、生物制品無(wú)菌檢測(cè),檢測(cè)好氧菌和厭氧菌
HBPT032-52	硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管（15ml） Thiolglycollate Medium	20支/盒	用于藥品,、生物制品無(wú)菌檢測(cè),檢測(cè)好氧菌和厭氧菌
HB8518-2	GAM培養(yǎng)基(不含葡萄糖和可溶性淀粉)Gifu Anaerobic Medium	250g	用于厭氧菌的培養(yǎng)
HB9260	胰蛋白酶胰蛋白胨葡萄糖酵母膏肉湯基礎(chǔ)(TPGYT)TPGYT Broth Base	250g	用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)
HB0282	動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基Motility Nitrate Medium	250g	用于蠟樣芽孢桿菌動(dòng)力試驗(yàn)
HB0283	含鐵牛奶培養(yǎng)基Iron Milk Medium	250g	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的牛奶發(fā)酵試驗(yàn)
HB0284	梭菌鑒別瓊脂（DCA）Differential Clostridial Agar	250g	用于干燥食品中亞硫酸鹽還原梭菌的計(jì)數(shù)
HB0285	強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）Differential Reinforced Clostridial Agar	250g	用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB0286	強(qiáng)化梭菌瓊脂Reinforced Clostridium Agar	250g	用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB0316	強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基（RCM）Reinforced Medium for Clostridium	250g	用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB0303	TSN瓊脂TSN Agar	250g	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)
HB0304	亞硫酸鐵瓊脂Sulfite Iron Agar	250g	用于厭氧亞硫酸鹽還原梭菌的平板計(jì)數(shù)
HB0306	CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ)CHO Medium Base	250g	用于厭氧菌的糖、醇發(fā)酵生化試驗(yàn)
HB0307	Schaedler 瓊脂Schaedler Agar	250g	用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB0309	厭氧菌瓊脂Anaerobic Agar	250g	用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB0310	CDC厭氧菌瓊脂CDC Anaerobic Agar	250g	用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB8655	亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子液體培養(yǎng)基Sulfite Reducing Anaerobes Spore Liquid Medium	250g	用于亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子的增菌培養(yǎng)
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HB8718	明膠磷酸鹽緩沖液Gelatin Phosphate Buffer	250g	用于檢測(cè)肉毒梭菌時(shí)樣品稀釋液
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HBPT032-5	硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管（15ml）	15ml*20支/盒	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗(yàn)的細(xì)菌培養(yǎng)
SN088	含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基	1ml*20支	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌生化試驗(yàn)
HB0286-1	梭菌屬測(cè)定用培養(yǎng)基Clostridium Test Medium	250g	用于梭菌屬細(xì)菌檢測(cè)
HB0124-1a	硫酸慶大霉素（4mg）（凍干粉）	4mg*5支/盒	每支添加于200ml哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基中或培養(yǎng)基Q中
HBPT032	液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基管（20ml）	20ml*20/盒	用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗(yàn)的細(xì)菌培養(yǎng)
HB9005	胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯（TPGY）Trypticase Glucose Yeast Extract Broth	250g	用于檢測(cè)肉毒梭菌樣品的增菌培養(yǎng)
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HB0286	強(qiáng)化梭菌瓊脂Reinforced Clostridium Agar	250g	用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
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HB9007-1	卵黃瓊脂培養(yǎng)基Egg Yolk Agar Medium	250g	用于肉毒梭菌的分離培養(yǎng)
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HB0284-1	梭菌鑒別瓊脂（DCA）Differential Clostridial Agar	250g	用于嗜中溫厭氧芽孢菌培養(yǎng)
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一,、適用范圍

適用于食品、飲用水及臨床樣本中產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離和計(jì)數(shù),，依據(jù)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 4789.13《食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗(yàn)》進(jìn)行檢測(cè)[1][6],。

二、核心檢測(cè)方法

采用平板計(jì)數(shù)法：樣品經(jīng)稀釋后接種于TSC瓊脂,，厭氧培養(yǎng)后計(jì)數(shù)典型黑色菌落,。培養(yǎng)基中的焦亞硫酸鈉和檸檬酸鐵銨與細(xì)菌代謝產(chǎn)物反應(yīng)形成黑色沉淀，D-環(huán)絲氨酸抑制非目標(biāo)菌生長(zhǎng)[3][6],。

三、檢出限與定量限

檢出限為1 CFU/g（或mL）,，定量限為10 CFU/g（或mL）,，依據(jù)GB 4789.13要求設(shè)定，需通過(guò)空白對(duì)照和低濃度樣品驗(yàn)證靈敏度[1],。

四,、質(zhì)控樣品要求

1. 陽(yáng)性對(duì)照：產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌株（如ATCC 13124）應(yīng)形成典型黑色菌落；
2. 陰性對(duì)照：添加非目標(biāo)菌（如大腸桿菌）應(yīng)無(wú)生長(zhǎng),；
3. 每批次需包含10%平行樣,，結(jié)果偏差≤15%[3][6]。

五,、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 培養(yǎng)基配制：每250mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基添加1支0.5% D-環(huán)絲氨酸溶液,，50℃水浴混勻后傾注平板；
2. 厭氧培養(yǎng)：35-37℃厭氧環(huán)境培養(yǎng)24-48小時(shí),；
3. 結(jié)果判讀：典型菌落為黑色中心,，周?chē)腥榘咨珪炄1][3]。

六,、特別說(shuō)明

1. D-環(huán)絲氨酸需現(xiàn)用現(xiàn)配,，過(guò)濾除菌后加入冷卻至50℃的培養(yǎng)基；
2. 卵黃乳液需無(wú)菌操作制備,，4℃保存不超過(guò)7天,；
3. 培養(yǎng)基pH嚴(yán)格控制在7.6±0.2，偏差過(guò)大會(huì)影響選擇性[3][6],。

以上信息僅供參考,，請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)！