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當(dāng)前位置： 首頁(yè) 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 培養(yǎng)基 強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）/用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)（GB/T5750.12-2023/SN088）
強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）/用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)（GB/T5750.12-2023/SN088）_
圖片僅供參考,，具體產(chǎn)品以實(shí)物為準(zhǔn),！

強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）/用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù)（GB/T5750.12-2023/SN088）

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強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）介紹：

用途：用于食品和其它物質(zhì)中梭菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù),。

成分（g/L）

牛肉浸粉8.0
胰酪蛋白胨5.0
蛋白胨5.0
酵母浸粉1.0
葡萄糖1.0
可溶性淀粉1.0
醋酸鈉5.0
L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5
檸檬酸鐵銨0.5
亞硫酸鈉0.75
刃天青0.002
瓊脂15.0
pH值7.6±0.225℃

檢驗(yàn)原理：

胰酪蛋白胨，牛肉浸粉，蛋白胨,，可溶性淀粉,，酵母浸粉和L-半胱氨酸鹽提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,；葡萄糖提供碳源,；刃天青是氧化還原指示劑；醋酸鈉可抑制革蘭氏陰性菌,；檸檬酸鐵銨和亞硫酸鈉是硫化氫指示劑,；瓊脂是培養(yǎng)基凝固劑。

用法：

稱取本品42.75g,，加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,，分裝試管，121℃高壓滅菌15分鐘,，備用,。

注：培養(yǎng)基中含淀粉、檸檬酸鐵,，滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀,。

產(chǎn)氣莢膜梭菌在強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）上的生長(zhǎng)特征：

強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）微生物靈敏度試驗(yàn)：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基，接種以下質(zhì)控菌株,，放置36±1℃厭氧培養(yǎng)24-48小時(shí),。 注：回收率計(jì)算時(shí)，用TSC瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基,。

強(qiáng)化梭菌鑒別瓊脂（DRCA）相關(guān)產(chǎn)品：
產(chǎn)品貨號(hào)產(chǎn)品名稱產(chǎn)品規(guī)格產(chǎn)品說(shuō)明及用途
HB9203ET發(fā)酵培養(yǎng)基ET Fermention Medium250g用于厭氧菌培養(yǎng)
HB0255產(chǎn)芽孢肉湯Sporulation Broth250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)基(SN標(biāo)準(zhǔn))
HB0256亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂基礎(chǔ)(SPS)Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine Agar Base250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))因標(biāo)準(zhǔn)更新,，停止生產(chǎn)，請(qǐng)采購(gòu)HB0256-2
HB0256a多粘菌素B（1.2mg）Polymyxin B1.2mg/支*5每支添加于100ml SPS中
HB0258多價(jià)蛋白胨-酵母膏(PY)培養(yǎng)基Polypeptone Yeast Extract Medium250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌糖（醇）發(fā)酵的基礎(chǔ)培養(yǎng)基
HB0259庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)Cooked Meat Medium Base250g用于厭氧菌的增菌培養(yǎng)
HB0260庖肉牛肉粒Dried Meat Particle100g加入HB0259 庖肉培養(yǎng)基基礎(chǔ)中,，配成庖肉培養(yǎng)基
HB5190液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基Thiolglycollate Medium250g用于藥品,、生物制品無(wú)菌檢測(cè)，檢測(cè)好氧菌和厭氧菌（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB0262卵黃瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)Egg Yolk Agar Base250g用于肉毒梭菌,、產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HBPT9260TPGYT肉湯管（含無(wú)菌胰酶(1:250)溶液）（15ml）15ml*20支/盒用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)
HBJ8718含50ml 明膠磷酸鹽緩沖液均質(zhì)袋Gelatin Phosphate Buffer50ml*10用于檢測(cè)肉毒梭菌時(shí)樣品稀釋液
HBPM9007-1卵黃瓊脂培養(yǎng)基平板（9cm）(2-8℃)Egg Yolk Agar Medium9cm*10用于肉毒梭菌的分離培養(yǎng)
HBPT032-8硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管（9ml）Thiolglycollate Medium9ml*20/盒用于藥品,、生物制品無(wú)菌檢測(cè),檢測(cè)好氧菌和厭氧菌
HBPT032-52硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管（15ml） Thiolglycollate Medium20支/盒用于藥品、生物制品無(wú)菌檢測(cè),檢測(cè)好氧菌和厭氧菌
HB8518-2GAM培養(yǎng)基(不含葡萄糖和可溶性淀粉)Gifu Anaerobic Medium250g用于厭氧菌的培養(yǎng)
HB9260胰蛋白酶胰蛋白胨葡萄糖酵母膏肉湯基礎(chǔ)(TPGYT)TPGYT Broth Base250g用于肉毒梭菌的增菌培養(yǎng)
HB0282動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基Motility Nitrate Medium250g用于蠟樣芽孢桿菌動(dòng)力試驗(yàn)
HB0283含鐵牛奶培養(yǎng)基Iron Milk Medium250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的牛奶發(fā)酵試驗(yàn)
HB0284梭菌鑒別瓊脂（DCA）Differential Clostridial Agar250g用于干燥食品中亞硫酸鹽還原梭菌的計(jì)數(shù)
HB0286強(qiáng)化梭菌瓊脂Reinforced Clostridium Agar250g用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB0316強(qiáng)化梭菌培養(yǎng)基（RCM）Reinforced Medium for Clostridium250g用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB0303TSN瓊脂TSN Agar250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)
HB0304亞硫酸鐵瓊脂Sulfite Iron Agar250g用于厭氧亞硫酸鹽還原梭菌的平板計(jì)數(shù)
HB0306CHO培養(yǎng)基基礎(chǔ)CHO Medium Base250g用于厭氧菌的糖,、醇發(fā)酵生化試驗(yàn)
HB0307Schaedler 瓊脂Schaedler Agar250g用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB0309厭氧菌瓊脂Anaerobic Agar250g用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB0310CDC厭氧菌瓊脂CDC Anaerobic Agar250g用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB8655亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子液體培養(yǎng)基Sulfite Reducing Anaerobes Spore Liquid Medium250g用于亞硫酸鹽還原厭氧菌孢子的增菌培養(yǎng)
HB0256-2亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶(SPS)瓊脂Sulfite-Polymyxin-Sulphadiazine-Agar250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB/T5750.12-2023 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn))
HBPM0256亞硫酸鹽-多粘菌素-磺胺嘧啶瓊脂平板(9cm）9cm*10/包用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(GB/T5750.12-2023 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn))
HB829550%卵黃乳液50% egg Yolk emulsion5ml*10每20ml添加于250mlTSC瓊脂基礎(chǔ)中
HB0256b磺胺嘧啶鈉溶液（12mg）Sodium sulfadiazine1ml*5每支添加于100mlSPS中
HB5218-10.1%蛋白胨水0.1% Peptone Broth250g用于樣品的稀釋
HB0261Wilkins-Chalgren 瓊脂Wilkins-Chalgren Agar250g用于厭氧菌的分離培養(yǎng)
HB0308MCP瓊脂MCP Agar250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)
HB0253-1SC瓊脂基礎(chǔ)Sulfite Cycloserine Agar Base250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的計(jì)數(shù)和培養(yǎng)
HB8718明膠磷酸鹽緩沖液Gelatin Phosphate Buffer250g用于檢測(cè)肉毒梭菌時(shí)樣品稀釋液
HBPM0253-9胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂(TSC)平板（9cm）9cm*10/包用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)
HBPT032-5硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基管（15ml）15ml*20支/盒用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗(yàn)的細(xì)菌培養(yǎng)
SN088含1%棉籽糖的PY培養(yǎng)基1ml*20支用于產(chǎn)氣莢膜梭菌生化試驗(yàn)
HB0286-1梭菌屬測(cè)定用培養(yǎng)基Clostridium Test Medium250g用于梭菌屬細(xì)菌檢測(cè)
HB0124-1a硫酸慶大霉素（4mg）（凍干粉）4mg*5支/盒每支添加于200ml哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基中或培養(yǎng)基Q中
HBPT032液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基管（20ml）20ml*20/盒用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確證試驗(yàn)的細(xì)菌培養(yǎng)
HB9005胰蛋白胨葡萄糖酵母浸膏肉湯（TPGY）Trypticase Glucose Yeast Extract Broth250g用于檢測(cè)肉毒梭菌樣品的增菌培養(yǎng)
HB9007厭氧卵黃瓊脂基礎(chǔ)Anaerobic Egg Yolk Agar Base250g用于肉毒梭菌的分離培養(yǎng)
HB0253-9胰胨-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)(TSC)TSC Agar Base250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB0253aD-環(huán)絲氨酸溶液5ml*10每支添加于100ml
HB0286強(qiáng)化梭菌瓊脂Reinforced Clostridium Agar250g用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB8318-3氯化鈉胰蛋白胨稀釋液(TPS)NaCl Tryptone Broth250g用于檢測(cè)亞硫酸鹽還原梭菌的樣品制備
HB8470厭氧培養(yǎng)液BL Agar Medium Base250g用于厭氧菌增菌培養(yǎng)
HB8311產(chǎn)氣莢膜梭菌測(cè)定用培養(yǎng)基Clostridium Perfringens Assay Medium 250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的分離培養(yǎng)
HB8503緩沖甘油-氯化鈉溶液Buffered glycerol - Sodium Chloride Solution250g用于檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌時(shí)樣品的貯存
HB8508-1乳糖亞硫酸鹽培養(yǎng)基（LS）Lactose Sulfite Medium(LS)250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌確認(rèn)試驗(yàn)
HB8511哥倫比亞培養(yǎng)基Columbia Medium250g用于多種微生物的增菌培養(yǎng)
HB0316-3梭菌強(qiáng)化培養(yǎng)基(USP)(Reinforced medium for clostridia)Reinforced medium for clostridia250g用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HB8506FS培養(yǎng)基FS Medium250g用于梭桿菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB8508LS培養(yǎng)基Lactose Sulfite Medium(LS)250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的生化試驗(yàn)
HB8594EG培養(yǎng)基EG Medium250g用于絕對(duì)厭氧菌計(jì)數(shù)
HB8779厭氧肉肝湯培養(yǎng)基Anaerobic250g用于一般厭氧菌培養(yǎng)及其制品的檢驗(yàn)用
HBJ8318-3含225ml氯化鈉胰蛋白胨稀釋液10個(gè)/盒用于樣品的稀釋
HB9007-1卵黃瓊脂培養(yǎng)基Egg Yolk Agar Medium250g用于肉毒梭菌的分離培養(yǎng)
HB8518-1GAM培養(yǎng)基Gifu Anaerobic Medium250g用于厭氧菌的培養(yǎng)
JX055-1鐵粉Iron Powder100g/瓶加入庖肉培養(yǎng)基中,，可用于肉毒梭菌的培養(yǎng)
HB0284-1梭菌鑒別瓊脂（DCA）Differential Clostridial Agar250g用于嗜中溫厭氧芽孢菌培養(yǎng)
HB0253胰?-亞硫酸鹽-環(huán)絲氨酸瓊脂基礎(chǔ)（TSC）Tryptose Sulfite Cycloserine Agar Base250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的平板計(jì)數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))因標(biāo)準(zhǔn)更新，停止生產(chǎn),，請(qǐng)采購(gòu)HB0253-9
HBPT0283含鐵牛乳培養(yǎng)基管（10ml）Iron Milk Medium Tube10ml*20支用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的牛奶發(fā)酵試驗(yàn)
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一,、適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品,、藥品,、環(huán)境樣本中梭菌屬（如產(chǎn)氣莢膜梭菌）的分離、鑒別及定量檢測(cè),，尤其針對(duì)厭氧條件下生長(zhǎng)的梭菌進(jìn)行選擇性培養(yǎng)[2][8],。

二、核心檢測(cè)方法

采用傾注培養(yǎng)法：樣品經(jīng)增菌處理后,，取1ml稀釋液與冷卻至50℃的DRCA培養(yǎng)基混合,，雙層瓊脂覆蓋后厭氧培養(yǎng)24-48小時(shí)，通過(guò)黑色菌落特征和硫化氫反應(yīng)進(jìn)行鑒別[2],。

三,、檢出限與定量限

檢出限為20 CFU/g（基于質(zhì)控菌株驗(yàn)證），定量范圍20-200 CFU/平板,，菌落回收率（PR）≥0.7時(shí)判定為有效定量[2][8],。

四、質(zhì)控樣品要求

需同步接種產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124（B型/D型）及陰性對(duì)照菌株（如大腸桿菌ATCC25922）,，菌液濃度控制在20-200 CFU/平板,，質(zhì)控菌株在36±1℃培養(yǎng)后應(yīng)呈現(xiàn)典型黑色菌落特征[2][8]。

五,、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 培養(yǎng)基制備：42.75g干粉溶解于1000ml蒸餾水,，121℃滅菌15分鐘
2. 樣品處理：按1:9比例接種增菌液，37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)
3. 雙層接種：首層混合15ml培養(yǎng)基與樣品液,，凝固后再覆蓋10ml培養(yǎng)基
4. 厭氧培養(yǎng)：正置于厭氧裝置,，36±1℃培養(yǎng)24-48小時(shí)[2][8]

六,、特別說(shuō)明

1. 培養(yǎng)基pH需嚴(yán)格控制在7.6±0.2（25℃測(cè)定）
2. 刃天青指示劑變紅表明氧化環(huán)境異常,，需重新制備培養(yǎng)基
3. 檸檬酸鐵銨與亞硫酸鈉反應(yīng)產(chǎn)生的黑色沉淀為特征判定指標(biāo)
4. 本方法需結(jié)合生化試驗(yàn)或分子鑒定進(jìn)行最終確認(rèn)[2][8]

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