腸球菌瓊脂（膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂）/用于食品和水中腸球菌的計(jì)數(shù)（GB4789.35-2023/GB/T5750.12-2023）
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MH瓊脂即用型平板
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用途:用于食品和水中腸球菌的計(jì)數(shù),。
疊氮化鈉的作用
疊氮化鈉主要抑制革蘭氏陰性細(xì)菌的生長(zhǎng)發(fā)育，對(duì)變形桿菌抑制效果非常顯著,。
成分(g/L):
用法
稱取本品56.3g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15min,冷至46±1℃,傾入含1ml 樣品液平皿中,約15ml 培養(yǎng)基,混勻,凝固,。35± 2℃倒置培養(yǎng)基培養(yǎng)24±2h。注：從保溫開始至做成平板的時(shí)間不要超過(guò)4h,。
注:培養(yǎng)基中有少量檸檬酸鐵銨,，滅菌后可能有微量黑色沉淀，搖勻倒平板即可正常使用,。
腸球菌瓊脂微生物質(zhì)控結(jié)果：
糞腸球菌
褐色菌落,，菌落周圍變黑
屎腸球菌
褐色菌落，菌落周圍變黑
金黃色葡萄球菌
部分抑制
大腸埃希氏菌
抑制
腸球菌瓊脂原理及現(xiàn)象：
腸球菌瓊脂(膽汁-七葉苷疊氮鈉瓊脂）微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置35±2℃需氧培養(yǎng)24±2小時(shí)。注：回收率計(jì)算時(shí),，用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基,。
以上信息僅供參考，請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn),！
GB 4789.40-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 腸球菌檢驗(yàn)
適用范圍：適用于食品中腸球菌的定性檢測(cè),，包括糞腸球菌和屎腸球菌等典型致病菌株的篩選。
核心檢測(cè)方法：采用膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂作為選擇性培養(yǎng)基,，通過(guò)典型菌落形態(tài)（黑色暈圈）和生化試驗(yàn)（七葉苷水解）進(jìn)行鑒定,。
檢出限與定量限：最低檢出限為1 CFU/g，定量檢測(cè)需結(jié)合平板計(jì)數(shù)法,，有效計(jì)數(shù)范圍為10-300 CFU/平板,。
質(zhì)控樣品要求：每批次實(shí)驗(yàn)需同步接種糞腸球菌（ATCC 29212）作為陽(yáng)性對(duì)照，大腸埃希氏菌（ATCC 25922）作為陰性對(duì)照,。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟：① 樣品均質(zhì)后梯度稀釋,；② 36℃±1℃培養(yǎng)24-48小時(shí)；③ 挑取典型菌落進(jìn)行膽汁耐受試驗(yàn)和PYR水解試驗(yàn)驗(yàn)證,。
特別說(shuō)明：疊氮鈉抑制革蘭氏陰性菌效果顯著,，但對(duì)部分鏈球菌屬可能產(chǎn)生交叉反應(yīng)，需結(jié)合分子鑒定確認(rèn),。
SN/T 1933.1-2007 動(dòng)物產(chǎn)品中腸球菌檢測(cè)
適用范圍：進(jìn)出口動(dòng)物源性食品和飼料中腸球菌的分離與計(jì)數(shù),，重點(diǎn)關(guān)注公共衛(wèi)生風(fēng)險(xiǎn)控制。
核心檢測(cè)方法：規(guī)定使用膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂進(jìn)行初篩,，結(jié)合API 20 Strep或VITEK系統(tǒng)完成生化鑒定,。
檢出限與定量限：定量檢測(cè)要求樣品稀釋度選擇需保證至少1個(gè)平板出現(xiàn)30-300個(gè)典型菌落。
質(zhì)控樣品要求：要求每20個(gè)樣品設(shè)置1組陰陽(yáng)性對(duì)照,，并定期使用標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證培養(yǎng)基選擇性,。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟：強(qiáng)調(diào)樣品前處理需采用緩沖蛋白胨水預(yù)增菌，培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)至48小時(shí)以提高檢出率,。
特別說(shuō)明：明確培養(yǎng)基pH值需控制在7.2±0.2,，高壓滅菌后需冷卻至50℃以下方可添加疊氮鈉。
以上信息僅供參考,，請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn),！