紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂(USP標(biāo)準(zhǔn))(Violet Red Bile Glucose Agar)/用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別
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2216E海水瓊脂即用型平板
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酵母浸粉
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胰蛋白胨
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DSMZ231培養(yǎng)基
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含20%蔗糖的麥芽即用型平板
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用途:用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
胰酶解明膠和酵母浸粉提供碳氮源和微量元素;水合葡萄糖是可發(fā)酵的糖類;氯化鈉可維持均衡的滲透壓;脫氧膽酸鈉和結(jié)晶紫抑制革蘭氏陽性菌,特別抑制革蘭氏陽性桿菌和糞腸球菌;中性紅為pH 指示劑。
用法:
Suspend41.5g/liter, heat to boiling with frequent stirring until completely?dissolved.
稱取本品41.5g,加熱溶解于1000ml純化水中,煮沸不要超過2分鐘,冷至50℃左右時(shí)傾入無菌平皿。無需高壓滅菌。
不同細(xì)菌在紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂上生長特征:
銅綠假單胞菌
淡紅色菌落至橙黃色菌落
大腸埃希氏菌
紅色菌落,有膽鹽沉淀環(huán)
金黃色葡萄球菌
抑制
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置30-35℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。 注:回收率計(jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基。
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適用于藥品中腸道菌計(jì)數(shù)及腸桿菌科鑒別,特別針對耐膽鹽革蘭氏陰性菌的選擇性分離培養(yǎng)[4][7]。
基于膽鹽抑制原理,通過葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)酸使中性紅指示劑顯色,區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌[2][4]。
要求質(zhì)控菌株(如大腸埃希菌CMCC(B)44102)接種量≤102 CFU時(shí),需在18-24小時(shí)內(nèi)形成典型菌落[4][7]。
需驗(yàn)證培養(yǎng)基的pH(7.4±0.2)、生長能力(銅綠假單胞菌等)及指示能力(菌落顯色特征)[4][9]。
1. 稱量41.5g干粉溶解于1L蒸餾水
2. 煮沸至完全溶解(無需滅菌)
3. 傾注平板后冷卻至45-50℃使用[2][4]。
培養(yǎng)基含結(jié)晶紫(0.002g/L)和中性紅(0.03g/L),需避光保存;腸桿菌科菌落呈紫紅色,直徑0.5-2mm[4][9]。
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