三糖鐵瓊脂培養(yǎng)基(USP標(biāo)準(zhǔn))(Triple SugarIronAgar Medium)/用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選
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用途:用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選。
成分(g/L):
用法:
Suspend 64.5g/liter, heat to boilling?for 1 min with shaking. Fill into tubes?to one-third of their height, sterilise?by heating in an? autoclave at 121℃?for?15 min and allow to cool in a position that gives a deep portion and a sloping?surface.稱取本品64.5g,加熱溶解于1000ml純化水中,加熱煮沸1分鐘,分裝于16mm×150mm試管,121℃高壓滅菌15分鐘制成高層斜面。
注:培養(yǎng)基中含少量硫酸亞鐵銨,滅菌后可能出現(xiàn)少量黑色沉淀。
檢驗(yàn)原理:
該培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖,只能利用葡萄糖的細(xì)菌,葡萄糖被分解產(chǎn)酸使斜面先變黃,但因量少,生產(chǎn)的少量酸。因接觸空氣而氧化,加之細(xì)菌生長利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì),生成堿性產(chǎn)物,故斜面后來又變紅。底部由于厭氧狀態(tài),酸類不被氧化,仍保持黃色。而發(fā)酵乳糖的細(xì)菌,則產(chǎn)生大量的酸,使整個(gè)培養(yǎng)基呈黃色。另外,因某些細(xì)菌能分解含硫氨基酸,生成硫化氫,硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應(yīng)生成黑色的硫化亞鐵沉淀。?
三糖鐵瓊脂(TSI)上的細(xì)菌生長情況:
三糖鐵管? 大腸埃希氏菌、沙門氏菌、志賀氏菌
三糖鐵瓊脂(TSI)試管使用及注意事項(xiàng):三糖鐵瓊脂(USP)微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置30-35℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。
食品中沙門氏菌檢驗(yàn)(2)—沙門氏菌生化鑒定:
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1. 糖發(fā)酵:產(chǎn)酸使酚紅指示劑變黃(斜面與底層顏色變化差異反映糖利用特征)
2. 硫化氫檢測:與硫酸亞鐵反應(yīng)生成黑色沉淀[6][9]。
2. 陰性對照:大腸桿菌(全培養(yǎng)基黃色無黑斑)
3. 質(zhì)控頻率:每批次培養(yǎng)基驗(yàn)證[6][9]。
2. 滅菌條件:121℃高壓滅菌15分鐘
3. 接種方法:穿刺底層+斜面劃線
4. 培養(yǎng)條件:36±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)[3][6]。
2. 注意事項(xiàng):滅菌后立即冷卻防過熱,開封后需密封防吸濕,制備后3天內(nèi)使用[3][9]。
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