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當(dāng)前位置: 首頁 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 菌種 培養(yǎng)基 亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基(USP)(Bismuth Sulfite Agar Medium)/用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基(USP)(Bismuth Sulfite Agar Medium)/用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)_
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亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基(USP)(Bismuth Sulfite Agar Medium)/用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)

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操作視頻|BS平板的制備

用途

用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng),。

成分(g/L)

胰酪蛋白胨 5.0
蛋白胨 5.0
牛肉粉 5.0
硫酸亞鐵 0.3
亞硫酸鉍 8.0
磷酸氫二鈉 4.0
葡萄糖 5.0
亮綠 0.025
瓊脂 20.0
pH值7.6±0.2 25℃

檢驗(yàn)原理
蛋白胨、牛肉粉在培養(yǎng)基中作為基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì),為細(xì)菌生長提供所需的氮源,、碳源、維生素及一些礦物質(zhì)等元素,;葡萄糖可作為細(xì)菌生長代謝所需的能量物質(zhì),;磷酸鹽對培養(yǎng)環(huán)境pH值起到緩沖作用,。煌綠和亞硫酸鈉能抑制大腸桿菌,、變形桿菌和革蘭氏陽性菌的生長,,但對傷寒、副傷寒等沙門氏菌的生長沒有影響,。傷寒沙門氏菌及其他沙門氏菌能利用葡萄糖,,將亞硫酸鹽還原成硫化物并與硫酸亞鐵反應(yīng)使得菌落呈黑色,此外還可把鉍離子還原成金屬鉍,,使菌落呈現(xiàn)金屬光澤,,從而使沙門氏菌得到分離。

用法

稱取本品52.3克,,加熱攪拌溶解于1000ml純化水中,,冷卻至50℃,傾入滅菌平皿,。不要過分加熱,,無需高壓滅菌。

注:培養(yǎng)基中的檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉反應(yīng)生成不溶物,,培養(yǎng)基呈渾濁狀,,有黑色沉淀,搖勻后倒平板使用即可,。

質(zhì)量控制和典型特征

沙門氏菌在37℃培養(yǎng)24-48小時后,,棕褐色或灰色至黑色,有時有金屬光澤,,周圍培養(yǎng)基呈棕色或黑色,,有些菌株呈灰綠色,周圍培養(yǎng)基不變或微變暗,。

沙門氏菌在亞硫酸鉍瓊脂(BS)生長特征:


傷寒沙門氏菌CMCC50071 菌落呈黑褐色,,有金屬光澤

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GB 4789.4-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門氏菌檢驗(yàn)

適用范圍
本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品及食品加工環(huán)境中沙門氏菌的定性檢測,。亞硫酸鉍瓊脂培養(yǎng)基(USP)作為選擇性分離培養(yǎng)基,用于沙門氏菌的選擇性培養(yǎng)與初步鑒定,,尤其適用于含復(fù)雜微生物群的樣本(如乳制品,、肉類制品)[8]。
核心檢測方法
1. 預(yù)增菌:使用緩沖蛋白胨水(BPW)復(fù)蘇損傷菌體
2. 選擇性增菌:采用TTB和SC兩種增菌液同步培養(yǎng)
3. 選擇性分離:劃線接種亞硫酸鉍瓊脂(BS),,37℃培養(yǎng)24-48小時
4. 生化鑒定:典型菌落進(jìn)行三糖鐵瓊脂(TSI)和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)[8]
檢出限與定量限
? 最低檢出限:1 CFU/25g(經(jīng)增菌后)
? 定量要求:在BS瓊脂上需分離出典型菌落(直徑2-4mm,,呈棕黑色或灰色,帶金屬光澤)[8]
質(zhì)控樣品要求
1. 陽性對照:鼠傷寒沙門氏菌ATCC 14028
2. 陰性對照:大腸埃希氏菌ATCC 25922
3. 培養(yǎng)基質(zhì)控:每批次需驗(yàn)證選擇性和靈敏度,抑制率應(yīng)≥90%,,目標(biāo)菌回收率≥70%[8]
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 培養(yǎng)基配制:分步溶解成分,,避免過度加熱(檸檬酸鉍銨與亞硫酸鈉需單獨(dú)溶解)
2. 滅菌條件:煮沸溶解瓊脂,不高壓滅菌
3. 接種方法:采用四區(qū)劃線法,,第三,、四區(qū)需出現(xiàn)單個菌落
4. 培養(yǎng)觀察:24小時初判,48小時終判[4][8]
特別說明
1. 時效性:配制后需避光保存,,48小時內(nèi)使用
2. 干擾處理:高脂樣本需先用滅菌吐溫80預(yù)處理
3. 結(jié)果判讀:需結(jié)合TSI斜面產(chǎn)堿/底層產(chǎn)酸,、H?S陽性等特征綜合判斷[8]

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