凍干兔血漿/用于金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗（GB,、SN標準）（GB/T5750.12-2023）
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【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：凍干兔血漿
【包裝規(guī)格】
0.5ml×10支
【預期用途】
用于金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗（GB,、SN標準）,。
【檢驗原理】
細菌生成血漿凝固酶后釋放于血漿中，稱為游離凝固酶,，不直接作用到血漿纖維蛋白原上,，而是被血漿中的致活劑（即凝固酶致活因子）激活后變成耐熱的凝固酶樣物質，此物質纖維蛋白原變?yōu)楣虘B(tài)纖維蛋白,，血漿因而凝固。致病性葡萄球菌能產(chǎn)生凝固酶,。
【主要組成成份】
凍干兔血漿,、檸檬酸鈉,。
【儲存條件及有效期】
1.2℃-25℃避光保存，環(huán)境濕度≤80%,。
2.在儲存條件下有效期為一年,。
【樣本要求】
樣本的收集、儲存,、處理,、運輸應嚴格執(zhí)行無菌操作，避免污染,，
【檢驗方法】
方法1：按箭頭方向掀開并撕下鋁箔蓋,，每支西林瓶中加入0.5ml滅菌生理鹽水輕微搖晃至完全溶解，然后加入0.3ml（SN)）或0.2ml-0.3ml（GB）肉湯培養(yǎng)物,，充分混合后,，置36℃±1℃培養(yǎng)。
方法2：按箭頭方向掀開并撕下鋁箔蓋,，每支西林瓶中加入0.8ml肉湯培養(yǎng)物輕微搖晃至完全溶解,，置36℃±1℃培養(yǎng)。
【參考值（參考范圍）】
本品的空白對照應無菌生長,。
【檢驗結果的解釋】
每半小時觀察一次,，觀察6 h，如呈現(xiàn)凝固（即傾斜或倒置時,，呈現(xiàn)凝塊）或凝固體積大于原體積的一半,，被判定為陽性結果。
【注意事項】
1,、可疑菌落需同時接種在5ml的BHI肉湯中和營養(yǎng)瓊脂上
? Baird-Parker平板上或血平板上的可疑菌落需同時接種在5ml的BHI肉湯中和營養(yǎng)瓊脂上,，如果出現(xiàn)可疑菌在BHI肉湯出現(xiàn)生長狀態(tài)不良，菌液濁度不夠的情況,，可用營養(yǎng)瓊脂上的菌落重新接種BHI肉湯進行活化,。
2、必須使用新鮮的BHI肉湯培養(yǎng)物
? 血漿凝固酶實驗必須使用新鮮的BHI肉湯培養(yǎng)物,。“新鮮”應理解為,，培養(yǎng)物從培養(yǎng)箱取出后，立即進行試驗,。以保證培養(yǎng)物的酶活力良好,。避免出現(xiàn)因取出一段時間后，因酶活力降低而引起的假陰性,。
3,、加入BHI肉湯培養(yǎng)物后，要輕輕轉動瓶身至混合均勻
? 兔血漿中加入BHI肉湯培養(yǎng)物后,，要輕輕轉動瓶身至混合均勻,，不要采取劇烈搖晃的方式,。
4、試驗應每半小時觀察一次
??不可直接觀察第6h后的結果,。一些金葡菌能夠產(chǎn)生蛋白酶來分解纖維蛋白,，而出現(xiàn)先凝集而后消融的情況，保證每半小時觀察一次,，防止因觀察不及時,，而誤判成假陰性。觀察凝固情況時,，采用將西林瓶緩慢傾斜或倒置的方式,。切記不要采用搖晃的方式進行觀察！當凝固體積大于原體積一半,，即可判為陽性,。
結果判斷：
?編號
?產(chǎn)品名稱
?結果判斷
?培養(yǎng)時間?
備注?
?陽性
陰性?
HB4117-4
兔凍干血漿
全凝或凝固體積大于一半
不凝固
2-6h
接種肉湯培養(yǎng)物0.3ml于安瓿瓶內，充分混合,，
置36±1℃培養(yǎng),，定時觀察是否有凝塊形成。
血漿凝固酶實驗操作視頻：
不同細菌在凍干兔血漿上的生化反應：
凍干兔血漿微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質控菌株,，放置36±1℃需氧培養(yǎng)2-6小時。
以上信息僅供參考,，請以實物批次為準,！
一、適用范圍
二,、核心檢測方法
1. 生理鹽水復溶后加入0.2ml-0.3ml菌液（GB方法）
2. 直接加入0.8ml菌液復溶（快速法）[2][10]。
三,、檢出限與定量限
四,、質控樣品要求
2. 陽性對照：使用標準金黃色葡萄球菌菌株（如ATCC 25923）
3. 樣本處理：嚴格執(zhí)行無菌操作,，避免交叉污染[2][10]。
五,、關鍵實驗步驟
2. 混合培養(yǎng)：充分混勻后立即置于恒溫培養(yǎng)箱
3. 結果觀察：每30分鐘觀察一次,，持續(xù)6小時
4. 結果驗證：必要時通過乳膠凝集實驗復核[2][10]。
六,、特別說明
2. 含0.25%氯化鈣的血漿可提高凝固靈敏度
3. 非致病性葡萄球菌（如表皮葡萄球菌）需排除干擾
4. 實驗環(huán)境濕度需≤80%[2][10]。
以上信息僅供參考,，請以相應標準的原文為準,！