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甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)/用于分離培養(yǎng)病原性金黃色葡萄球菌（日本標(biāo)準(zhǔn)）（GB/T5750.12-2023）

HB4125

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甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)介紹：

用途：用于分離培養(yǎng)病原性金黃色葡萄球菌（日本標(biāo)準(zhǔn)）,。

添加劑：

每瓶需配套添加6盒HB8295 50%卵黃乳液使用,，每支添加于166ml甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ),。

檢驗(yàn)原理：

蛋白胨和牛肉粉提供氮源,、維生素和生長(zhǎng)因子,；D-甘露醇為可發(fā)酵糖類；氯化鈉可抑制除葡萄球菌外的大部分微生物的生長(zhǎng),；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑,；酚紅為pH指示劑，金黃色葡萄球菌可分解培養(yǎng)基中的甘露醇產(chǎn)酸,，使菌落周圍變黃,，并能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產(chǎn)生暈圈。

用法：

稱取本品112.5g,，加熱溶解于1000ml蒸餾水中,，煮沸1分鐘,，121℃高壓滅菌15分鐘，冷卻至45-50℃時(shí),，無(wú)菌操作加入50%卵黃乳液30ml,，搖勻，傾入無(wú)菌平皿,。

不同細(xì)菌在甘露醇卵黃培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征：

甘露醇卵黃培養(yǎng)基(日本標(biāo)準(zhǔn))微生物靈敏度試驗(yàn)：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí),。注：回收率計(jì)算時(shí),，用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。

甘露醇卵黃培養(yǎng)基基礎(chǔ)相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說(shuō)明及用途
HB4114-6	10%氯化鈉胰酪胨大豆肉湯10% NaCl Soybean-Casein Digest Broth	250g	用于金黃色葡萄球菌增菌培養(yǎng)
HB4114	胰蛋白胨大豆肉湯（TSB）Trypticase (Tryptic) Soy Broth	250g	一種通用的微生物營(yíng)養(yǎng)增菌肉湯,，也可用于金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定和藥品生產(chǎn)線無(wú)菌灌裝試驗(yàn)（SN,、USP、EP標(biāo)準(zhǔn)）
HB4115	Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)Baird-Parker Agar Base	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)（GB,、FDA,、ISO、SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4116-1	亞碲酸鉀卵黃增菌液	5ml*10	每支添加于95mlBaird-Parker瓊脂基礎(chǔ)或瓊脂培養(yǎng)基O中
HB4118	DNA酶瓊脂DNase Agar	100g	用于細(xì)菌DNA酶檢測(cè)
HB4119	7.5%氯化鈉肉湯7.5% Sodium Chloride Broth	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養(yǎng)（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4120	腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基Enterotoxin-producing medium	250g	用于金黃色葡萄球菌腸毒素產(chǎn)毒試驗(yàn)
HB4121	亞碲酸鹽肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)Sodium Tellurite Broth Base	250g	用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)（中國(guó)藥典）
HB4122	葡萄球菌增菌肉湯Staphylococcus Enrichment Broth	250g	用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB8299	甲苯胺藍(lán)-DNA酶瓊脂Toluidine Blue DNA Agar	100g	用于DNA酶試驗(yàn)
HBPT0109-4	普通瓊脂培養(yǎng)基管（長(zhǎng)斜面）20支Nutrient Agar Slant Tube	20支/盒	用于細(xì)菌的純化培養(yǎng)
HB0153	哥倫比亞CNA瓊脂基礎(chǔ)Columbia CNA Agar Base	250g	用于革蘭氏陽(yáng)性球菌的分離培養(yǎng)
HB4123-1	葡萄球菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基110號(hào)Staphylococcus Selective Agar NO.110	250g	用于金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
HB4123-1	葡萄球菌選擇性瓊脂培養(yǎng)基110號(hào)Staphylococcus Selective Agar No.110	250g	用于金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
HB4127	改良Giolitti and Cantoni肉湯Modified Giolitti and Cantoni Broth	250g	用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)
HB4152	TMP瓊脂培養(yǎng)基TMP Agar Medium	250g	用于金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
HB8478	腦心浸液瓊脂Brain Heart Infusion Agar	250g	營(yíng)養(yǎng)豐富,，用于培養(yǎng)各種細(xì)菌
HB0374	普通肉湯培養(yǎng)基Broth Medium	250g	用于金黃色葡萄球菌和其它細(xì)菌的增菌培養(yǎng)
HB4123	葡萄球菌選擇性瓊脂Staphylococcus Selective Agar	250g	用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
HBPT4114	TSB肉湯管（9ml）Trypticase(Tryptic) Soy Broth	9ml*20支	一種通用的微生物營(yíng)養(yǎng)增菌肉湯,也可用于金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定和藥品生產(chǎn)線無(wú)菌灌裝試驗(yàn)
HB0109-1	營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面Nutrient agar slant	250g	用于細(xì)菌的純化培養(yǎng)
HB8297-8	腦心浸液肉湯(BHIB)培養(yǎng)基BHI Broth	250g	營(yíng)養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌(GB/T5750.12-2023 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn))
HB8478-12	腦心浸萃瓊脂(BHIA)培養(yǎng)基Brain Heart Infusion Agar	250g	營(yíng)養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌(GB/T5750.12-2023 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn))
HBPM8478-12	腦心浸萃瓊脂（BHIA）培養(yǎng)基平板(9CM）Brain Heart Infusion Agar	9cm*10/包	營(yíng)養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌(GB/T5750.12-2023 生活飲用水標(biāo)準(zhǔn))
HB6242	豆粉瓊脂	250g	用于分離營(yíng)養(yǎng)要求較高的致病菌
HB8621-1	磷酸鹽緩沖液（pH7.2）PBS broth	250g	用于樣品的稀釋
HBJ008	含225ml7.5%氯化鈉肉湯均質(zhì)袋	10個(gè)/盒	用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB8278	革蘭氏染色液試劑盒Gram Stain Kit	5ml*8	用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)
HB8297-1	腦心浸液肉湯(BHI)Brain Heart Infusion Broth	250g	營(yíng)養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌
HBPM8299	甲苯胺藍(lán)-DNA酶平板（9cm）	9cm*10/包	用于金黃色葡萄球菌核糖酸酶檢測(cè)
HB8297-5	腦心浸出液肉湯（BHI）GB標(biāo)準(zhǔn)Brain Heart Infusion Broth	250g	營(yíng)養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌
HB4120-1	腸毒素產(chǎn)毒培養(yǎng)基(不含瓊脂)Enterotoxin Toxigenic Medium	250g	用于金黃色葡萄球菌腸毒素產(chǎn)毒試驗(yàn)
HB4128	甘露醇高鹽瓊脂Mannitol Salt Agar	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
HB8644	卻普曼瓊脂Chapman Agar	250g	用于檢測(cè)金黃色葡萄球菌
HB4117-4	凍干兔血漿Freeze	0.5ml*10	用于金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(yàn)（GB,、SN標(biāo)準(zhǔn)）
HBKP4125	甘露醇卵黃培養(yǎng)基（顆粒）Egg-Yolk Mannitol Salt agar Base	250g	用于金葡菌的分離培養(yǎng)
HBKP4128-22	甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基（顆粒）Mannitol Salt Agar	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
HBPM5024	甘露醇氯化鈉瓊脂平板（9cm）Mannitol Salt Agar Plate	10個(gè)/包	用于金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)
HB4114-4	胰酪胨大豆肉湯（TSB）Soybean-Casein Digest Broth	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養(yǎng)（公共衛(wèi)生場(chǎng)所檢驗(yàn)）
HBKP8478	腦心浸液瓊脂（顆粒）Brain Heart Infusion Agar	250g	營(yíng)養(yǎng)豐富，用于培養(yǎng)各種細(xì)菌
HB4128-22	甘露醇氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基(中國(guó)藥典)Mannitol Salt Agar	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)
HBPT0109-1	營(yíng)養(yǎng)瓊脂斜面管（20支）Nutrient Agar Slant Tube	20支	用于細(xì)菌的純化培養(yǎng)
HBBD0109-200	營(yíng)養(yǎng)瓊脂(NA) 袋裝即用型(200ml)Nutrient Agar	200ml/袋*10	細(xì)菌計(jì)數(shù),、不含糖,，可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用（GB標(biāo)準(zhǔn)）

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GB 4789.10-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 金黃色葡萄球菌檢驗(yàn)

適用范圍

適用于食品中金黃色葡萄球菌的分離培養(yǎng)與鑒定,，通過(guò)甘露醇發(fā)酵及卵磷脂酶活性特征進(jìn)行目標(biāo)菌篩選[1]。

核心檢測(cè)方法

采用選擇性培養(yǎng)基（含7.5%氯化鈉抑制非目標(biāo)菌）結(jié)合生化特性：菌落周圍變黃（甘露醇發(fā)酵產(chǎn)酸）及產(chǎn)生暈圈（卵磷脂酶分解卵黃）作為判定依據(jù)[1],。

檢出限與定量限

檢出限為1 CFU/g,，定量限通過(guò)梯度稀釋法確定，通常選擇30-300 CFU的可計(jì)數(shù)平板范圍,。

質(zhì)控樣品要求

需同時(shí)接種目標(biāo)菌（如金黃色葡萄球菌ATCC 25923）與非目標(biāo)菌（如大腸埃希氏菌ATCC 25922）,，驗(yàn)證培養(yǎng)基選擇性與特異性[1]。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 培養(yǎng)基制備：112.5g干粉溶于1L蒸餾水,，121℃滅菌15分鐘,，冷卻至45-50℃加入30ml 50%卵黃乳液[1]。
2. 涂布接種：0.1ml樣品液均勻涂布平板,，同時(shí)劃線接種非目標(biāo)菌對(duì)照[1],。
3. 培養(yǎng)條件：36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)，觀察菌落形態(tài)及顏色變化,。

特別說(shuō)明

1. 卵黃乳液需無(wú)菌添加,，避免高溫導(dǎo)致凝固[1],。
2. 高鹽環(huán)境可能抑制部分受損菌，需結(jié)合增菌步驟提高靈敏度,。
3. 出現(xiàn)黃色菌落但無(wú)暈圈需進(jìn)一步做凝固酶試驗(yàn)確認(rèn),。

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