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RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基（顆粒）/用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng)

HBKP4198-11

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RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基
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RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基（顆粒）介紹：

用途：用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng),。

成分(g/L)：

大豆胨	4.5
六水合氯化鎂	29.0
氯化鈉	8.0
磷酸氫二鉀	0.4
磷酸二氫鉀	0.6
孔雀綠	0.036
pH值5.2 ± 0.2	25℃

培養(yǎng)基組分說(shuō)明除了微生物生長(zhǎng)必須的碳源、氮源外,，還有孔雀綠和六水合氯化鎂,。孔雀綠的主要用途是抑制殺滅真菌,、大腸菌群,；六水合氯化鎂的用途是抑制變形桿菌和大腸桿菌的生長(zhǎng)。在這里,，美國(guó)藥典和歐洲藥典并未說(shuō)明不同培養(yǎng)基組分的混合順序,，但是中國(guó)藥典明確了除了孔雀綠外,，其他要先混合溶解,，之后才加入孔雀綠,，然后進(jìn)行滅菌。原因是：孔雀綠為有毒的致癌物,，盡量減少與之接觸,。不過(guò)，除了培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè),，現(xiàn)在的藥廠都是購(gòu)買成品干粉或顆粒培養(yǎng)基,，按照供應(yīng)商的說(shuō)明書(shū)，直接稱取相應(yīng)的干粉或顆粒重量,，加入純化水即可,。另外，這里需要注意的是,，與其他常用的培養(yǎng)基的滅菌條件121℃不同的是,，該培養(yǎng)基滅菌溫度為不超過(guò)115℃。那為什么會(huì)不一樣呢,，原因在于六水合氯化鎂,。六水氯化鎂又名水氯石、結(jié)晶氯化鎂,、鹵片,、鹵粉，英文名magnesium chloride hexahydrate,，分子量203,。常溫下為無(wú)色單斜晶體，呈柱狀或針狀或片狀,，有苦味,，密度1.56g/cm3，易溶于水和乙醇,，在濕度較大時(shí),，容易潮解。在空氣中加熱分解：100℃時(shí)失去2分子結(jié)晶水,；在110℃開(kāi)始失去部分氯化氫而分解,，強(qiáng)熱轉(zhuǎn)為氧氯化物；在熔點(diǎn)118℃時(shí)熱熔分解,，釋放出HCl氣體而變成氯氧化合物,；高溫下加熱則分解為MgO和HCl。由上可知,，該培養(yǎng)基不能用常規(guī)的121℃進(jìn)行滅菌,，所以藥典規(guī)定了115℃滅菌。檢驗(yàn)原理：大豆蛋白胨在培養(yǎng)基中作為基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供所需的碳源,、氮源,、維生素以及一些礦物質(zhì)等元素；氯化鎂提供必需的離子,；氯化鈉維持均衡的滲透壓,；磷酸鹽作為培養(yǎng)基的緩沖劑?？兹妇G能夠抑制非沙門(mén)氏菌的生長(zhǎng),。

用法：

稱取本品27.1g,加熱攪拌溶解于1000ml純化水中,分裝試管,115℃高壓滅菌20分鐘,備用。

在RV沙門(mén)增菌液體培養(yǎng)基中,，鼠傷沙門(mén)氏菌為渾濁,；腸炎沙門(mén)氏菌為渾濁；

乙型副傷寒沙門(mén)菌為渾濁,；大腸埃希氏菌為抑制或部分抑制,；金黃色葡萄球菌為抑制。

RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基（顆粒）微生物靈敏度試驗(yàn):

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置30-35℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。?

RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基（顆粒）同名產(chǎn)品推薦：

HB4198-11 RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基（中國(guó)藥典） 250g

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HBPT4198-11 RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基管（10ml）（中國(guó)藥典） 10ml*20支

RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基（顆粒）相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說(shuō)明及用途
HB5211	卵黃氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基Egg-Yolk Salt Agar Medium	250g	用于金黃色葡萄球菌的選擇性分離培養(yǎng)（中國(guó)藥典）
HB8914	酚紅肉湯Phenol Red Broth	250g	用于測(cè)定藥品的抗菌性實(shí)驗(yàn)
HBPT4198	RVS肉湯管（10ml）	10ml*20支	用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
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HB7010	曙紅亞甲基藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（EMB）Eosin-Methylene Blue Agar	250g	弱選擇性培養(yǎng)基,、用于分離腸道致病菌,，特別是大腸桿菌
HB6238	麥康凱瓊脂MacConkey Agar Medium	250g	用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng)
HB5213	MUG培養(yǎng)基MUG Medium	100g	用于大腸桿菌測(cè)定（中國(guó)藥典）
HB4086-3	四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基（TTB）Tetrathionate Broth Base	250g	用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB4089-1	沙門(mén)、志賀菌屬瓊脂培養(yǎng)基(SS)(中國(guó)藥典)	250g	用于沙門(mén)氏菌,志賀氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
HB4121	亞碲酸鹽肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ)Sodium Tellurite Broth Base	250g	用于金黃色葡萄球菌的增菌培養(yǎng)（中國(guó)藥典）
HB0124-1a	硫酸慶大霉素（4mg）（凍干粉）	4mg*5支/盒	每支添加于200ml哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基中或培養(yǎng)基Q中
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HB4087-1	膽鹽硫乳瓊脂培養(yǎng)基	250g	腸道菌選擇性培養(yǎng)基,，特別是沙門(mén)氏菌的選擇性分離
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HBPT0316-1	梭菌增菌培養(yǎng)基管（10ml）	10ml*20支/盒	用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
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HB0316-1	梭菌增菌培養(yǎng)基（中國(guó)藥典）Clostridium enrichment Medium	250g	用于梭菌的增菌培養(yǎng)和計(jì)數(shù)
HBPP002-100	麥康凱液體培養(yǎng)基瓶裝（100ml）MacConkey Broth	100ml*20瓶	用于大腸埃希菌選擇性增菌培養(yǎng)
HBPP003-100	RV沙門(mén)菌增菌液體培養(yǎng)基瓶裝（100ml）RV Salmonella Enrichment Medium	100ml*20瓶	用于沙門(mén)氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
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一,、適用范圍

該培養(yǎng)基適用于藥品,、食品及臨床樣本中沙門(mén)氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)，通過(guò)低pH值,、孔雀綠及氯化鎂的協(xié)同作用抑制非目標(biāo)菌生長(zhǎng),，提升目標(biāo)菌檢出率。中國(guó)藥典（2015版）與歐洲藥典均明確其作為沙門(mén)氏菌檢測(cè)的關(guān)鍵步驟[8][5],。

二,、核心檢測(cè)方法

基于選擇性抑制原理：孔雀綠抑制革蘭氏陽(yáng)性菌及部分腸道菌群,，氯化鎂增強(qiáng)滲透壓選擇性，磷酸鹽緩沖體系維持pH 5.2±0.2的酸性環(huán)境,。中國(guó)藥典規(guī)定需結(jié)合TSB預(yù)增菌后接種,，42℃培養(yǎng)18-24小時(shí)[8][2]。

三,、檢出限與定量限

當(dāng)接種量≤100 CFU時(shí)，乙型副傷寒沙門(mén)氏菌（CMCC(B)50094）在30-35℃培養(yǎng)18-24小時(shí)應(yīng)達(dá)到與對(duì)照培養(yǎng)基相當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)率,，表明其檢出限滿足≤10 CFU/mL的靈敏度要求[1][8],。

四、質(zhì)控樣品要求

質(zhì)控菌株需包括目標(biāo)菌（如乙型副傷寒沙門(mén)氏菌）與非目標(biāo)菌（如大腸埃希氏菌,、金黃色葡萄球菌）,。目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)渾濁生長(zhǎng)，非目標(biāo)菌需完全抑制或部分抑制,，每批次培養(yǎng)基需進(jìn)行生長(zhǎng)率對(duì)比驗(yàn)證[1][8],。

五、關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 配制：稱取27.1g干粉溶于1L純化水,，115℃滅菌15-20分鐘（溫度達(dá)到115℃后開(kāi)始計(jì)時(shí)）
2. 接種：取TSB預(yù)增菌液0.1mL加入10mL RV培養(yǎng)基
3. 培養(yǎng)：42±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí)[3][7][8]

六,、特別說(shuō)明

滅菌溫度需嚴(yán)格控制在≤115℃，因六水合氯化鎂高溫易分解,。成品干粉培養(yǎng)基應(yīng)驗(yàn)證D121℃值（通常按0.5min計(jì)）,，通過(guò)殘存概率法計(jì)算生物負(fù)荷降低值（LR≥8）。pH值需在滅菌冷卻至25℃后測(cè)定[3][7][8],。

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