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腸沙門氏菌腸亞種鼠傷寒血清型（GB 4789.28）

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研究、質(zhì)量控制,，《GB 4789.28 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》標準菌株,。

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適用范圍
適用于食品,、藥品及化學品中致突變物的檢測，通過微生物回復突變試驗評估遺傳毒性風險[1],。

核心檢測方法
采用鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型菌株,，結(jié)合哺乳動物微粒體酶（S9）進行體外代謝活化，通過回復突變率判斷受試物致突變性[1],。

檢出限與定量限
需設(shè)置自發(fā)回變對照,，陽性化合物回變菌落數(shù)需達到陰性對照的2倍以上方判定為陽性結(jié)果。

質(zhì)控樣品要求
必須包含TA97、TA98,、TA100,、TA102等標準菌株，同時設(shè)置陽性對照組（如疊氮鈉,、2-氨基芴等）驗證系統(tǒng)靈敏度[1],。

關(guān)鍵實驗步驟
① 菌株遺傳特性驗證；② 劑量范圍確定,；③ 代謝活化系統(tǒng)配制,；④ 平板摻入法培養(yǎng)；⑤ 菌落計數(shù)與數(shù)據(jù)分析,。

特別說明
需嚴格控制S9混合物的活性,，試驗需在生物安全二級實驗室進行，菌株應定期進行基因型驗證[1],。

適用范圍
針對畜禽養(yǎng)殖場,、食品加工環(huán)節(jié)中鼠傷寒沙門氏菌與腸炎沙門氏菌的快速鑒別檢測[6]。

核心檢測方法
雙重PCR技術(shù),，通過特異性引物同時擴增兩種病原體的invA基因和sefA基因,，實現(xiàn)同步檢測[6]。

檢出限與定量限
最低檢測限為10² CFU/mL,，線性范圍10²-10⁷ CFU/mL,，Ct值≤35判定陽性。

質(zhì)控樣品要求
每批次需包含陰性對照（無菌PBS）和陽性對照（標準菌株ATCC 13311與ATCC 13076）[6],。

關(guān)鍵實驗步驟
① 樣品前處理與基因組提?。虎?PCR反應體系配制,；③ 擴增程序設(shè)置（預變性94℃ 5min,，35個循環(huán)）；④ 電泳分析（2%瓊脂糖凝膠）,。

特別說明
引物設(shè)計需避開血清型特異性抗原編碼區(qū),，避免交叉反應。實驗人員需具備生物安全三級防護資質(zhì)[6],。

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