腸沙門氏菌腸亞種鼠傷寒血清型Salmonella enterica subsp/ enterica serovar TyphimuriumCICC 21484(GB 4789.28-2013)
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Lentibacillus populi
DSM 101738 |
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Magnaporthe sp/CICC 2533
CICC 2533 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2570
CICC 2570 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2571
CICC 2571 | 見證書
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Rhizopus delemarCICC 3129
CICC 3129 | 見證書
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Rhizopus delemarCICC 3162
CICC 3162 | 見證書
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Lentibacillus populi
DSM 101738 |
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Magnaporthe sp/CICC 2533
CICC 2533 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2570
CICC 2570 | 見證書
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Septoria sp/CICC 2571
CICC 2571 | 見證書
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Rhizopus delemarCICC 3129
CICC 3129 | 見證書
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適用于食品、藥品及化學(xué)品中致突變物的檢測,通過微生物回復(fù)突變試驗(yàn)評估遺傳毒性風(fēng)險(xiǎn)[1]。
采用鼠傷寒沙門氏菌組氨酸缺陷型菌株,結(jié)合哺乳動物微粒體酶(S9)進(jìn)行體外代謝活化,通過回復(fù)突變率判斷受試物致突變性[1]。
需設(shè)置自發(fā)回變對照,陽性化合物回變菌落數(shù)需達(dá)到陰性對照的2倍以上方判定為陽性結(jié)果。
必須包含TA97、TA98、TA100、TA102等標(biāo)準(zhǔn)菌株,同時(shí)設(shè)置陽性對照組(如疊氮鈉、2-氨基芴等)驗(yàn)證系統(tǒng)靈敏度[1]。
① 菌株遺傳特性驗(yàn)證;② 劑量范圍確定;③ 代謝活化系統(tǒng)配制;④ 平板摻入法培養(yǎng);⑤ 菌落計(jì)數(shù)與數(shù)據(jù)分析。
需嚴(yán)格控制S9混合物的活性,試驗(yàn)需在生物安全二級實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,菌株應(yīng)定期進(jìn)行基因型驗(yàn)證[1]。
針對畜禽養(yǎng)殖場、食品加工環(huán)節(jié)中鼠傷寒沙門氏菌與腸炎沙門氏菌的快速鑒別檢測[6]。
雙重PCR技術(shù),通過特異性引物同時(shí)擴(kuò)增兩種病原體的invA基因和sefA基因,實(shí)現(xiàn)同步檢測[6]。
最低檢測限為102 CFU/mL,線性范圍102-107 CFU/mL,Ct值≤35判定陽性。
每批次需包含陰性對照(無菌PBS)和陽性對照(標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC 13311與ATCC 13076)[6]。
① 樣品前處理與基因組提取;② PCR反應(yīng)體系配制;③ 擴(kuò)增程序設(shè)置(預(yù)變性94℃ 5min,35個(gè)循環(huán));④ 電泳分析(2%瓊脂糖凝膠)。
引物設(shè)計(jì)需避開血清型特異性抗原編碼區(qū),避免交叉反應(yīng)。實(shí)驗(yàn)人員需具備生物安全三級防護(hù)資質(zhì)[6]。
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