牛津瓊脂(OXA)基礎/用于李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(ISO,、SN標準)(GB100)
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用途:用于李斯特氏菌的分離培養(yǎng)(ISO,、SN標準),。
添加劑:每瓶需配套添加9盒 HB4171-1 OXA添加劑使用,每支添加于100ml牛津瓊脂(OXA)基礎中,。
成分(g/L)
檢驗原理:特殊蛋白胨和可溶性淀粉提供碳氮源,、維生素和生長因子,;氯化鈉維持均衡的滲透壓;李斯特氏菌水解七葉苷與鐵離子反應形成黑色6,7-二羥基香豆素,;氯化鋰和其它的抗生素能抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽性菌,;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
用法:
稱取本品5.85g,,加熱溶解于100ml蒸餾水中,,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至50℃時,,加入1支牛津瓊脂抑菌劑【多粘菌素E(2mg),、放線菌酮(40mg)、吖啶黃素(0.5mg),、頭孢雙硫唑甲氧(0.2mg),、磷霉素(1mg)】,混勻,,傾入無菌平皿,,備用。
注:培養(yǎng)基中含少量淀粉,、檸檬酸鐵銨,,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。
單增李斯特氏菌在牛津瓊脂(OXA)基礎上的生長特征:
黑色菌落,,有黑色環(huán)
牛津瓊脂(OXA)基礎微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養(yǎng)基,,接種以下質控菌株,,放置35±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時,。 注:回收率計算時,用TSA瓊脂做對照培養(yǎng)基,。
以上信息僅供參考,,請以實物批次為準!
SN標準解讀(單增李斯特氏菌檢測)
01 適用范圍
適用于食品,、水質及環(huán)境樣本中單核細胞增生李斯特氏菌的選擇性分離檢測,,特別針對復雜基質樣本中目標菌的富集培養(yǎng)[1][6]。
02 核心檢測方法
基于選擇性抑制原理:
? 氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌
? 多粘菌素E,、放線菌酮等抗生素抑制非目標革蘭氏陽性菌
? 七葉苷水解反應作為特異性生化指示(黑色菌落)[2][6]
03 檢出限與定量限
? 最低檢出限:10 CFU/g(食品基質)
? 定量檢測范圍:102-10? CFU/mL(需配套增菌步驟)[6]
04 質控樣品要求
? 陽性對照:單核細胞增生李斯特氏菌ATCC 19115
? 陰性對照:金黃色葡萄球菌ATCC 25923
? 回收率要求:≥70%(與TSA對照培養(yǎng)基比較)[6]
05 關鍵實驗步驟
① 基礎培養(yǎng)基制備:56.5g/L蒸餾水溶解,,121℃滅菌15分鐘[2]
② 添加劑添加:冷卻至50℃時加入多粘菌素E(2mg/L)、放線菌酮(40mg/L),、吖啶黃素(0.5mg/L)[6]
③ 傾注平皿:厚度≥3mm,,凝固后4℃保存≤7天[1]
06 特別說明
? 培養(yǎng)基pH嚴格控制在7.0±0.2(25℃)
? 避免過度加熱導致的淀粉糊化(溶解溫度≤80℃)
? 含亞抑制劑量的頭孢雙硫唑甲氧(0.2mg/L)增強選擇性[6]
以上信息僅供參考,請以相應標準的原文為準,!