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緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)(BLEB)/用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)（FDA標(biāo)準(zhǔn)）（GB100）

HB4186

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250g

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緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)(BLEB)介紹：

用途：用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),。

添加劑：

每瓶需配套添加5盒HB4186b 吖啶黃素,，5盒HB4150c 放線菌酮,，5盒HB4160i 萘啶酮酸

每225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)中添加1支HB4186b 吖啶黃素,，1支HB4150c 放線菌酮,，1支HB4160i 萘啶酮酸。

成分（g/L）

胰胨蛋白胨	17.0
大豆蛋白胨	3.0
氯化鈉	5.0
磷酸氫二鉀	2.5
磷酸二氫鉀	1.35
磷酸氫二鈉	9.6
葡萄糖	2.5
酵母粉	6.0
丙酮酸鈉	1.1
pH值7.3±0.1	25℃

檢驗原理：

胰胨蛋白胨,、大豆蛋白胨和酵母粉提供氮源,、維生素和生長因子；葡萄糖提供碳源,，氯化鈉維持均衡的滲透壓,；磷酸二氫鉀和磷酸氫二鈉為緩沖劑。

用法：

稱取本品48.0g,，加熱溶解于1000ml蒸餾水中,，分裝，每瓶225ml,，121℃高壓滅菌15分鐘,，冷至室溫,，加入25g樣品,，30℃培養(yǎng)4小時,，再加入1支混合抗生素(萘啶酮酸9mg、吖啶黃素2.25mg,、放線菌酮11.25mg),，混勻，繼續(xù)30℃培養(yǎng)48小時,。

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)(BLEB)微生物質(zhì)控結(jié)果：

a：單增李斯特氏菌,，b：大腸埃希氏菌，c：空白對照

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)(BLEB)微生物靈敏度試驗：

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置30℃需氧培養(yǎng)48小時。

緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)(BLEB)相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說明及用途
HB4171-3	改良牛津瓊脂(MOX)Modified Oxford Medium(MOX)	250g	用于單增李氏菌的選擇分離培養(yǎng)(USDA-FSIS標(biāo)準(zhǔn))
HB4150b	吖啶黃素Acriflavine	3.75mg/支*5	每支添加于225ml HB4150中
HB4150c	放線菌酮（11.25mg）Cycloheximide	1ml*5支/盒	每支添加于225ml HB4186中
HB4155	李氏菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(MMA)Modified Mcbride Agar Base	250g	用于單增李斯特氏菌選擇性分離
HB4155a	復(fù)達欣Fortum	3mg/支*5	每支添加于100mlHB4155中
HB4158	糖發(fā)酵基礎(chǔ)肉湯Bromcresol Purple Broth Base	250g	用于微生物檢驗中各種糖發(fā)酵實驗,，無菌加入各種糖醇類物質(zhì)
HB4160	李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)Listeria Enrichment Broth Base	250g	添加奈啶酮酸,，吖啶黃素即為LB1，LB2,，用于李斯特氏菌二步增菌（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB4160b	萘啶酮酸(4.0mg)Nalidixic Acid	4.0mg*5	添加于200ml 李氏菌增菌肉湯
HB4160d	吖啶黃素(5.0mg)Acridine Flavin	5mg*5	添加于200ml李氏菌增菌肉湯
HB4167	七葉苷培養(yǎng)基Esculin Medium	10g	如需使用,，請以七葉苷代替
HB4171	牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)Oxford Agar Base	250g	用于李斯特氏菌的分離培養(yǎng)（ISO、SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4188	PALCAM瓊脂PALCAM Agar	250g	用于單增李斯特氏菌的選擇性分離
HB4190	Half–Fraser培養(yǎng)基Half-Fraser Medium	250g	用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB4193	Fraser培養(yǎng)基Fraser Medium	250g	用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HBKP4188	PALCAM瓊脂(顆粒)PALCAM Agar	250g	用于單增李斯特氏菌的選擇性分離
HB4188-1a	PALCAM添加劑1	1ml/支*5	添加于200mlPALCAM瓊脂基礎(chǔ)中
HB4189	LPM瓊脂LPM Agar	250g	用于單增李氏菌選擇性分離（加入七葉苷和檸檬酸鐵銨）（FDA標(biāo)準(zhǔn)）
HB4191	改良緩沖蛋白胨水（MBP）Modified Buffered Peptone Water	250g	用于單增李氏菌前增菌培養(yǎng)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HB4195	UVM培養(yǎng)基UVM Medium	250g	用于李氏菌的增菌培養(yǎng)
HB4195b	UVM添加劑2（鹽酸吖啶黃素2.7mg）UVM Supplement1	1ml*5支	取一支添加于225mlUVM培養(yǎng)基中
HB4194-2b	FB2添加劑FB2 Supplement	2ml*20支	用于添加到100mlFraser培養(yǎng)基中
HB4192	EB增菌液EB Enrichment Broth	250g	用于單增李斯特氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB4193-2b	檸檬酸鐵銨（0.05g/支）ironcitrate	1ml*5支	添加于100mlMFB培養(yǎng)基中
HB4193-2a	吖啶黃素（2.5mg/支）	1ml*5支	添加于100mlMFB培養(yǎng)基中
HB4193-2	MFB培養(yǎng)基MFB Medium	250g	用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB4150	含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯（TSB-YE）Trypticase Soy-Yeast Extract Broth	250g	用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)
HB4150a	萘啶酮酸Nalidixic Acid	10mg/支*5	每支添加于225mlHB4150中
HB4154	含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂（TSA-YE）Trypticase Soy-Yeast Extract Agar	250g	用于單增李氏菌的分純,，培養(yǎng)，可用于做7%羊血瓊脂
HB4171-1	OXA添加劑OXA Additive	1ml/支*5	每支添加于100ml牛津瓊脂（OXA）中
HB4189a	LPM瓊脂添加劑LPM Agar Additive	1ml*5	每支添加于100ml LPM瓊脂中
HB4190a	FB1（Half-Fraser）添加劑	5ml*2	每套添加于1000mlHB4190中
HB6235	血液瓊脂基礎(chǔ)Blood Agar Base	250g	用于分離營養(yǎng)要求較高的致病菌（GB標(biāo)準(zhǔn)）
HB8650	3%過氧化氫酶試劑3% Catalase Reagent	20支	用于過氧化氫酶試驗
HB4112	SIM培養(yǎng)基SIM power medium	250g	用于硫化氫,、動力,、吲哚試驗
HB4193-2a	吖啶黃素（2.5mg/支）	1ml/支*5	添加于100mlMFB培養(yǎng)基中
HB4193-2b	檸檬酸鐵銨（0.05g/支）ironcitrate	1ml/支*5	添加于100mlMFB培養(yǎng)基中
HB4160c1	吖啶黃素（3.0mg）Acridine Flavin	3.0mg/支*5	添加于225ml李氏菌增菌肉湯
HB4160a1	萘啶酮酸（5.0mg）Nalidixic Acid	5.0mg/支*5	添加于225ml李氏菌增菌肉湯
HB4160-2	李斯特氏菌增菌肉湯（LEB）Listeria Enrichment Broth	250g	用于李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB8497	PALCAM肉湯PALCAM Broth	250g	用于單增李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
HB8507	PBS緩沖液（PH7.4）PBS Solution	250g	用于檢測李斯特氏菌時樣品的制備
HB8519-1	7%羊血瓊脂基礎(chǔ)7%Sheep Blood Agar Base	250g	用于李斯特氏菌的溶血試驗
HB4195a	UVM添加劑1（萘啶酮酸4.5mg）Nalidixic Acid	1ml*5支	取一支添加于225mlUVM培養(yǎng)基中
HBPM4154	TSA-YE平板（9cm）TSA-YE Plate	9cm*10個/包	用于單增李斯特氏菌的分純培養(yǎng),也可用于做7%羊血瓊脂
GB100	SIM生化管SIM Tube	20支/盒	用于單增李斯特氏菌的生化
HB4188-1b	PALCAM添加劑2	5支/盒	每支添加于200ml
HB8471	克氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基Christensen Citrate Agar	250g	用于腸道菌的檸檬酸鹽利用實驗
HBPM4154	TSA-YE平板（9cm）TSA-YE Plate	9cm*10個/包	用于單增李斯特氏菌的分純培養(yǎng),也可用于做7%羊血瓊脂
HBPT016-5	LB1增菌液管（10ml）Listeria Enrichment Broth Tube	10ml*20支	用于李斯特氏菌增菌
HB4190a-3	FB1（Half-Fraser）添加劑A	2ml*20支	每支添加于225mlFraser培養(yǎng)基或Half-Fraser培養(yǎng)基中
HB4190a-4	FB1（Half-Fraser）添加劑B	2ml*20支	每支添加于225mlFraser培養(yǎng)基或Half-Fraser培養(yǎng)基中
HB4168-2	半固體動力培養(yǎng)基Semi-solid	250g	用于動力觀察,菌種保存,H抗原位相變異試驗

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適用范圍

適用于食品,、環(huán)境樣本中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的選擇性增菌培養(yǎng),，符合GB 4789.30-2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗》要求[3]。

核心檢測方法

基于選擇性增菌原理,，通過添加萘啶酮酸,、吖啶黃素和放線菌酮抑制雜菌，促進目標(biāo)菌生長,。需配合后續(xù)分離培養(yǎng)及生化鑒定完成完整檢測流程[3],。

檢出限與定量限

最低檢出限為1 CFU/g（25g樣品），定量限需通過陽性對照驗證,，滿足國標(biāo)對食品樣品中單增李斯特氏菌的定量檢測要求[3],。

質(zhì)控樣品要求

需同步進行陽性對照（單增李斯特氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株）和陰性對照（空白培養(yǎng)基），培養(yǎng)后陽性管應(yīng)顯濁度變化,，陰性管保持澄清[3],。

關(guān)鍵實驗步驟

1. 稱取48.0g基礎(chǔ)粉末溶解于1000ml蒸餾水
2. 121℃高壓滅菌15分鐘后冷卻至室溫
3. 加入樣品后30℃預(yù)培養(yǎng)4小時
4. 添加混合抗生素繼續(xù)培養(yǎng)48小時[3]

特別說明

培養(yǎng)溫度必須嚴(yán)格控制在30±1℃，超出范圍可能影響抗生素抑菌效果,。增菌后的培養(yǎng)物需在48小時內(nèi)完成轉(zhuǎn)種,，避免過度生長導(dǎo)致假陰性[3]。

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