O157顯色培養(yǎng)基/用于O157菌的顯色培養(yǎng),O157菌顯亮紅色,、淡紅色或紅色
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??大腸桿菌O157:H7顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,,用于食品,、病人糞便樣品中O157:H7菌的快速檢測。O157:H7菌顯亮紅色,、淡紅色或紅色,,菌落周圍沒有藍色暈圈,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色,、藍色或紫色,,菌落周圍有藍色暈圈;其它細菌顯藍色,、黃色或無色,。本培養(yǎng)基的特異性高,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果,,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基,。
成份(g/L)
CT添加劑? 1ml/支*5(已配套,無需另購)
?此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果,。
用法:
?稱取本品 17.2g,,加入 200ml 蒸餾水,加熱煮沸溶解并不停攪拌,,加熱 2 分鐘左右,。冷卻至 45-50℃ 時,加入一支CT添加劑混勻,,傾入無菌平皿,。
?注意:制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥,可在 36℃ 的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時,。
原理:
O157:H7菌顯亮紅色,、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈,,大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色,、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈,;其它細菌顯藍色、黃色或無色,。本培養(yǎng)基的特異性高,,可以克服SMAC培養(yǎng)基引起的假陽性和假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基,。
操作步驟
? 1,、按國家標準、SN標準,、FDA標準或其它方法制備樣品液,;
? 2,、取 25 克樣品液加入 225ml? mEC肉湯或mTSB肉湯中,36℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時,;
? 3,、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到O157菌顯色培養(yǎng)基上,,做 2 個平板,;
? 4、36℃ 培養(yǎng) 18-24h,,O157:H7菌顯亮紅色,、淡紅色或紅色,菌落周圍沒有藍色暈圈,;大腸桿菌和大腸菌群顯暗藍色,、藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈,;其它細菌顯藍色,、黃色或無色;
? 5,、對典型菌落可做O157:H7菌血清學(xué)試驗和全套生化試驗,。
? 注:必須在 36℃ 培養(yǎng) 24 小時內(nèi)判讀結(jié)果,以免菌落顏色發(fā)生變化,。
質(zhì)量控制
? 1,、外觀
? 此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,,呈灰白色,。制備好的平板呈藍色固體培養(yǎng)基。
? 2,、微生物試驗
? 在 36℃ 培養(yǎng) 18-24 小時:
質(zhì)控菌株
ATCC
生長情況
菌落顏色
?大腸桿菌O157
?35150
?+++
?亮紅色
?金黃色葡萄球菌
?25923
?-/+
?黃色或無色
?大腸桿菌
?25922
?+/-
?暗藍色,,菌落周圍有藍色暈圈
?沙門氏菌
?14028
?+++
?藍色
?奇異變形桿菌
?12453
?+/-
?無色
?肺炎克雷伯氏菌
?10031
?+/-
?藍色,菌落周圍有藍色暈圈
?弗氏檸檬酸鹽桿菌
?43864
?+/-
?藍色菌落有紫色中心,,菌落周圍有藍色暈圈
?坂崎桿菌
?29004
?++
?紫色至藍色
方法的局限性
? 本培養(yǎng)基上的典型大腸桿菌O157:H7必須做血清學(xué)試驗或生化試驗,。
典型特征
? 典型大腸桿菌O157:H7菌顯亮紅色、淡紅色或紅色,,菌落周圍沒有藍色暈圈,;大腸桿菌和大腸菌群顯藍色或紫色,菌落周圍有藍色暈圈,;其它細菌顯藍色,、黃色或無色;
O157顯色培養(yǎng)基
大腸埃希氏菌O157:H7 ATCC35150
O157顯色培養(yǎng)基
大腸埃希氏菌O157:H7 ATCC43888
貯存
? 制備好的平板可保存 2-5 天,,應(yīng)避免光線直接照射,。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存,。失效
? 干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期,、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
注意
? 此培養(yǎng)基僅供實驗室使用,。
參考文獻
? 1,、Rappaport, F., and E. Henig. 1952. Media for the isolation and differentiation of pathogenic Escherichia coli (serotypes 0111 and 055). J. Clin. Pathol. 5:361-362.
? 2、 U.S. Food and Drug Administration. 1995. Bacteriological analytical manual, 8 th ed., AOAC International, Gaithersburg, MD.?
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O157顯色培養(yǎng)基的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養(yǎng)基,,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時,。
以上信息僅供參考,,請以實物批次為準!
一,、適用范圍
二、核心檢測方法
三,、關(guān)鍵實驗步驟
2. 樣品處理:增菌培養(yǎng)(如42℃腸道菌增菌肉湯18小時),。
3. 接種與培養(yǎng):劃線分離后36±1℃培養(yǎng)18-24小時,觀察菌落顏色及形態(tài)[1][2][3],。
四,、質(zhì)控樣品要求
五、特別說明
2. 制備后的培養(yǎng)基應(yīng)表面干燥,避免冷凝水干擾結(jié)果判讀,。
3. 顯色結(jié)果需結(jié)合生化試驗(如乳糖發(fā)酵,、賴氨酸脫羧酶試驗)及血清學(xué)鑒定確認[1][3][5]。
六,、檢出限與定量限
以上信息僅供參考,,請以相應(yīng)標準的原文為準,!