胰蛋白胨膽鹽X-葡糖苷酸(TBX)瓊脂/用于快速、準(zhǔn)確檢測大腸桿菌,,培養(yǎng)24小時(shí),,大腸桿菌顯藍(lán)綠色
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MH瓊脂即用型平板
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含纖維二糖)
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CASO瓊脂
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HL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基
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改良MRS瓊脂即用型平板
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? 胰蛋白胨膽鹽X-葡糖苷酸(TBX)瓊脂(TBX培養(yǎng)基)是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,用于食品,、水,、牛奶、冰激凌和肉制品中大腸桿菌的快速檢測,。大腸桿菌顯藍(lán)綠色,大腸菌群顯無色,,其它菌顯黃色或無色,,革蘭氏陽性菌被抑制。
成分(g/L):
此配方可以進(jìn)行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果,。
用法: 稱取本品36.6g加入1000ml蒸餾水,,加熱溶解并不停攪拌,煮沸不要超過1分鐘,。分裝三角瓶,,121℃高壓滅菌15分鐘。取1ml制備好的樣品液加入直徑為9cm無菌平皿中心,,傾入冷卻至45-50℃培養(yǎng)基約15ml,,混勻,凝固后,, 36±1℃倒置18~24h,。 或冷卻至45℃-50℃時(shí),傾入無菌平皿,,瓊脂完全凝固后,, 在超凈工作臺(tái)中開蓋吹15-30分鐘,去掉培養(yǎng)基表面水汽,,加入適當(dāng)稀釋度的樣品液1ml,, 涂布于培養(yǎng)基上,36±1℃培養(yǎng)18~24h,。
檢驗(yàn)原理:
特殊營養(yǎng)物質(zhì)提供微生物生長所需的碳氮源和微量元素,,維持均衡的滲透壓,并提供針對(duì)革蘭氏陽性細(xì)菌的選擇性,,特別是桿菌和糞鏈球菌,;顯色劑是由發(fā)色團(tuán)和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,,在特異性酶靶定作用下,游離出產(chǎn)色因子用于合成細(xì)胞使菌落顯示顏色,。在TBX培養(yǎng)基上,,大腸桿菌菌落顯藍(lán)綠色,其它菌顯黃色或無色,。操作步驟: 1,、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn),、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液; 2,、取樣品液1ml加入冷卻至45- -50℃顯色培養(yǎng)基中混勻或涂布于平板上; 3、36±1℃培養(yǎng)18~24h,選用有30~~200個(gè)菌落的平板,,計(jì)數(shù)平板上出現(xiàn)的典型大腸桿菌菌落,。大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落,??偞竽c桿菌=藍(lán)綠色菌落; 4、對(duì)可疑大腸桿菌菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上, 36±1℃培養(yǎng)12-16小時(shí),,挑取單菌落做大腸桿菌全套生化試驗(yàn)(本公司有生化鑒定管套裝4種x4套),。質(zhì)量控制: 1、外觀 此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,,具有良好的流動(dòng)性,,呈乳白色。制備好的平板呈無色透明固體,。
2 ,、微生物試驗(yàn)在 36±1℃培養(yǎng)18~24h小時(shí):
方法的局限性: 本培養(yǎng)基鑒定大腸菌群大腸桿菌,少數(shù)情況下可能會(huì)出現(xiàn)假陽性,,但不會(huì)出現(xiàn)假陰性,,有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。典型特征: 大腸桿菌典型菌落為藍(lán)綠色,,大腸菌群為無色菌落,,其它細(xì)菌為無色或黃色菌落。
貯存:制備好的平板應(yīng)立即使用,,應(yīng)避免光線直接照射,。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8C,,注意避光保存,。失效: 干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用,。注意: 此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用,。.參考文獻(xiàn): 1,、FRAMPTON, E.W., RESTAINO, L. a. BLASZKO, L.: Evaluation of B- glucuronidase substrate in a 24 hour direct plating method for Escherichia coli. J.Food Protection, 51; 402-404 (1988). 2、KILIAN, M. a. BULOW, P:: Rapid diagnosis of Enterobacteriaceae. I. Detection of bacterial glycosidasesActa Pathol. Microbiol. Scand. Sect. B 84; 245-251(1976).
TBX培養(yǎng)基的微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),。 注:回收率計(jì)算時(shí),,用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。
以上信息僅供參考,,請以實(shí)物批次為準(zhǔn),!
一、GB 4789.38 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸埃希氏菌計(jì)數(shù)
二,、ISO 16649-1:2018 食品鏈微生物學(xué) β-葡萄糖醛酸酶陽性大腸桿菌計(jì)數(shù)
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