弧菌顯色培養(yǎng)基平板(9cm)/用于弧菌的顯色培養(yǎng),,副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色,,霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色
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創(chuàng)傷弧菌
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弧菌屬
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鰻弧菌
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弧菌屬
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類弧菌
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MH瓊脂即用型平板
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含纖維二糖)
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CASO瓊脂
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HL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基
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改良MRS瓊脂即用型平板
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弧菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,用于食品,、海產(chǎn)品,、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測(cè)。副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色且菌落比較大,,霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色;其它細(xì)菌絕大部分被抑制,。本培養(yǎng)基的特異性高,,可以克服TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果,是一種很理想的快速檢測(cè)培養(yǎng)基,。 成份(g/L)
75.0
4.45
15.0
此配方可以進(jìn)行改良或增加營(yíng)養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果,。
檢驗(yàn)原理 利用弧菌自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色,以區(qū)分目標(biāo)菌與非目標(biāo)菌,。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色,。
操作步驟1,、按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn),、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液,; 2、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中,36±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時(shí),;3,、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液,劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上,,做 2 個(gè)平板,;4、36±1℃培養(yǎng) 18-24h,,副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色,,菌落比較大;霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色,,其它細(xì)菌絕大部被抑制;5,、對(duì)可疑菌落可劃線接種到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上,,36±1℃培養(yǎng)12-16小時(shí),挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗(yàn),。
包裝方式
? 一次性無菌塑料平皿 9cm
保存溫度:2-8℃
質(zhì)量控制1,、外觀
平板呈淡粉色至黃色固體培養(yǎng)基。2,、微生物試驗(yàn)在36±1℃培養(yǎng)18-24h小時(shí)
質(zhì)控菌株
菌株編號(hào)
生長(zhǎng)情況
菌落顏色
副溶血性弧菌
ATCC 17802
+++
藍(lán)綠色,,菌落比較大
金黃色葡萄球菌
ATCC 25923
-
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大腸桿菌
ATCC 25922
-
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溶藻弧菌
ATCC 17749
+++
淡黃色或米黃色
非01群霍亂弧菌
+++
紫紅色
創(chuàng)傷弧菌
ATCC 27562
+++
紫紅色
方法的局限性本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌,副溶血性弧菌的特異性可達(dá) 95%,,準(zhǔn)確性非常高,,有時(shí)可能需做其它補(bǔ)充試驗(yàn)。典型特征典型副溶血性弧菌顯藍(lán)綠色且菌落比較大,,霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,,溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色
貯存制備好的平板可保存 2-5 天,應(yīng)避免光線直接照射,。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,, 保存溫度 2-8℃,注意避光保存,。失效干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期,、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。注意此培養(yǎng)基僅供實(shí)驗(yàn)室使用,。參考文獻(xiàn)1,、Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi’s agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.2、Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.3,、Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott’s diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.
副溶血性弧菌的初步檢測(cè)視頻:
以上信息僅供參考,,請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn),!
弧菌顯色培養(yǎng)基應(yīng)用規(guī)范解讀
適用于食品、水產(chǎn)品及環(huán)境樣本中副溶血性弧菌,、霍亂弧菌等致病性弧菌的分離與初步鑒定,,特別適用于食源性疾病樣本的快速篩查[6]。
基于特異性酶底物顯色原理,,通過蛋白胨-酵母體系提供營(yíng)養(yǎng),,氯化鈉維持滲透壓,混合顯色劑與目標(biāo)菌代謝酶反應(yīng)產(chǎn)生特征性菌落顏色(副溶血性弧菌顯品紅色,,霍亂弧菌顯綠-藍(lán)綠色)[6][8],。
最低檢出限為10 CFU/g(食品樣本),定量檢測(cè)范圍102-10? CFU/g,。需配合增菌培養(yǎng)實(shí)現(xiàn)低濃度樣本檢測(cè)[6][8],。
每批次需同步測(cè)試陽(yáng)性對(duì)照(副溶血性弧菌ATCC 17802)和陰性對(duì)照(大腸桿菌ATCC 25922),陽(yáng)性菌落需呈現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)顯色特征,,陰性菌落應(yīng)完全抑制[6][8],。
1. 樣本預(yù)處理:25g樣本+225mL堿性蛋白胨水均質(zhì),36℃±1℃增菌8-12h
2. 平板接種:取增菌液劃線接種,,35-37℃培養(yǎng)24-48h
3. 結(jié)果判讀:觀察特征性顯色反應(yīng),,副溶血性弧菌呈品紅色,,霍亂弧菌呈綠-藍(lán)綠色[6][8]。
1. 培養(yǎng)基pH需嚴(yán)格控制在8.6±0.1,,高溫滅菌后需快速冷卻至50℃傾注平板
2. 溶藻弧菌可能呈現(xiàn)淡黃色干擾,,需結(jié)合氧化酶試驗(yàn)鑒別
3. 顯色反應(yīng)需在培養(yǎng)后24-48h內(nèi)判讀,超時(shí)可能導(dǎo)致顏色擴(kuò)散[6][8],。
以上信息僅供參考,,請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn)!