弧菌顯色培養(yǎng)基（第二代）/用于弧菌的顯色培養(yǎng),，副溶血性弧菌顯藍綠色，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色
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創(chuàng)傷弧菌
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弧菌屬
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鰻弧菌
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弧菌屬
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類弧菌
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MH瓊脂即用型平板
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)（含纖維二糖）
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CASO瓊脂
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HL-1細胞專用培養(yǎng)基
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改良MRS瓊脂即用型平板
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弧菌顯色培養(yǎng)基是青島海博生物公司改良的培養(yǎng)基,，用于食品、海產(chǎn)品、病人糞便樣品和水產(chǎn)品中副溶血性弧菌的快速檢測,。副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大,，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色,；其它細菌絕大部分被抑制,。本培養(yǎng)基的特異性高，可以克服TCBS培養(yǎng)基引起的假陰性結(jié)果,，是一種很理想的快速檢測培養(yǎng)基。 成份(g/L)
??75.0
??4.45
?15.0
此配方可以進行改良或增加營養(yǎng)成份以獲得最佳的結(jié)果,。
用法
稱取本品 18.9g 加入 200ml 蒸餾水,，加熱溶解并不停攪拌，煮沸3-5次,。冷卻至 45-50℃ 時,，傾入無菌平皿。?注意：制備好的培養(yǎng)基表面不能太干燥,。
原理? 利用弧菌自身代謝產(chǎn)生的酶與相應(yīng)顯色底物反應(yīng)使菌落顯色,，以區(qū)分目標菌與非目標菌。顯色底物是由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,，在特異性酶作用下,，游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。
操作步驟 1,、按國家標準,、SN標準、FDA標準或其它方法制備樣品液,； ? 2,、取 1ml 樣品液加入 9ml SCPB肉湯或堿性蛋白胨水中，36±1℃ 增菌培養(yǎng) 18-24 小時,；? 3,、用 3mm 接種環(huán)取 1 環(huán)增菌液，劃線接種到弧菌顯色培養(yǎng)基上,，做 2 個平板,；? 4、36±1℃培養(yǎng) 18-24h,，副溶血性弧菌顯藍綠色,，菌落比較大；霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色,，其它細菌絕大部被抑制；? 5,、對可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上,，36±1℃培養(yǎng)12-16小時,，挑取單菌落做副溶血性弧菌全套生化試驗。
質(zhì)量控制1,、外觀
? 此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,，具有良好的流動性，呈淡黃色,。制備好的平板呈淡粉色至黃色固體培養(yǎng)基,。?2、微生物試驗? 在36±1℃培養(yǎng)18-24h小時
質(zhì)控菌株
?菌株編號
?生長情況
?菌落顏色
副溶血性弧菌
ATCC 17802
+++
藍綠色,，菌落比較大
?金黃色葡萄球菌
ATCC 25923
-
?-
大腸桿菌
ATCC 25922
-
?-
溶藻弧菌
ATCC?17749
+++
淡黃色或米黃色
非01群霍亂弧菌
?+++
?紫紅色
創(chuàng)傷弧菌
ATCC 27562
+++
紫紅色
方法的局限性本培養(yǎng)基不能直接鑒定霍亂弧菌,，副溶血性弧菌的特異性可達 95%，準確性非常高,，有時可能需做其它補充試驗,。典型特征典型副溶血性弧菌顯藍綠色且菌落比較大，霍亂弧菌和創(chuàng)傷弧菌顯紫紅色,，溶藻弧菌顯淡黃色或米黃色
?
貯存制備好的平板可保存 2-5 天,，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,， 保存溫度 2-8℃,，注意避光保存。失效干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期,、結(jié)塊和顏色變化都不能使用,。注意 此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。參考文獻? 1,、Kobayashi, T., S. Enomoto, R. Sakazaki, and S. Kuwahara. 1963. A new selective medium for pathogenic vibrios, TCBS(modified Nakanishi’s agar). Jpn, J. Bacteriol. 18:387.? 2,、Nakanishi, Y. 1963. An isolation agar medium for cholerae and enteropathogenic halophilic vibrios. Modern Media. 9:246.? 3、Baron, E. J., L. R. Peterson, and S. M. Finegold. 1994. Vibrio and related species, Aeromonas, Plesiomonas, Campylobacter,Helicobacter, and others, p. 429-444. Bailey & Scott’s diagnostic microbiology, 9 th ed. Mosby-Year Book, Inc. St. Louis, MO.
以上信息僅供參考,，請以實物批次為準,！
國家標準 GB/T4789.7-2008 解讀
適用于食品、水產(chǎn)品及食物中毒樣品中副溶血性弧菌的分離與鑒定,，尤其針對海鮮類食品的微生物檢驗[4]
1. 3%氯化鈉堿性蛋白胨水增菌培養(yǎng)
2. 顯色培養(yǎng)基選擇性分離
3. 氧化酶試驗與生化鑒定聯(lián)用
最低檢出限為1 CFU/25g,，定量檢測需通過1:10梯度稀釋法實現(xiàn)[4]
要求使用ATCC標準菌株（如副溶血性弧菌ATCC17802）進行培養(yǎng)基性能驗證
1. 樣品均質(zhì)采用8000r/min旋轉(zhuǎn)刀片式處理1分鐘
2. 培養(yǎng)基煮沸溶解后50℃傾注平板
3. 37℃培養(yǎng)18-24小時觀察顯色反應(yīng)
培養(yǎng)基pH需嚴格控制在9.0±0.2，顯色判定需在24小時內(nèi)完成[4]
行業(yè)標準 SN0173-2010 解讀
進出口食品中弧菌屬檢測,，重點監(jiān)測霍亂弧菌和副溶血性弧菌[4]
脈沖場凝膠電泳(PFGE)分型與顯色培養(yǎng)基聯(lián)用技術(shù)
需平行使用TCBS瓊脂與顯色培養(yǎng)基進行方法學(xué)比對
行業(yè)標準 SN1022-2010 解讀
水產(chǎn)品中創(chuàng)傷弧菌的專項檢測,，特別適用于貝類樣品檢測[4]
要求顯色培養(yǎng)基對創(chuàng)傷弧菌的檢出靈敏度需≥90%
每批次檢測需包含陽性對照（創(chuàng)傷弧菌ATCC27562）
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