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乳糖-明膠生化管/用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的生化

SN079

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乳糖-明膠生化管介紹：

用途：用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的生化反應(yīng)

用法：用接種環(huán)取FTG培養(yǎng)液穿刺接種乳糖-明膠培養(yǎng)基,，于36℃±1℃，培養(yǎng)24h,，觀察結(jié)果,。

如發(fā)現(xiàn)產(chǎn)氣和培養(yǎng)基由紅變黃，表明乳糖并發(fā)酵并產(chǎn)酸,，將試管于5℃左右放置1h,檢查明膠液化情況,，如果培養(yǎng)基是固態(tài)的，于36℃±1℃,，再培養(yǎng)24h,，重復(fù)檢查明膠是否液化。產(chǎn)氣莢膜梭菌能發(fā)酵乳糖,，使明膠液化,。

不同細(xì)菌在乳糖-明膠生化管的生化反應(yīng)：

明膠液化實(shí)驗(yàn)操作視頻：

乳糖-明膠生化管微生物靈敏度試驗(yàn):

接種以下質(zhì)控菌株，放置36±1℃厭氧培養(yǎng)24-48小時(shí),。

注意事項(xiàng)：明膠的凝固點(diǎn)在28℃左右,，受運(yùn)輸過程的溫度及震蕩影響，有可能出現(xiàn)培養(yǎng)基在管壁凝固形成不規(guī)則狀,，此為正?，F(xiàn)象，并非質(zhì)量問題,，使用前可用水浴或培養(yǎng)箱或其他方法溫育,，使培養(yǎng)基呈液體流動(dòng)狀，擺直立即可,。

乳糖-明膠生化管相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說明及用途
HB9218a	BCSA抑菌劑	1ml*5支	每支添加于200ml HB9218洋蔥伯克霍爾德菌選擇性瓊脂(BCSA) 中
HB0254	D-環(huán)絲氨酸D-cycloserine	0.2g	每支過濾除菌后添加于500mlSC瓊脂基礎(chǔ)或500mlTSC中
HB4117-22a	0.25%氯化鈣溶液	0.25ml*10支	每支HB4117-22凍干草酸鉀兔血漿添加一支0.25%氯化鈣溶液
HB8619	異染顆粒染色液（改良Albert法）	(5ml2)2/盒	用于微生物的異染顆粒染色
HB8281	V-P試劑盒Voges-Proskauer Reagent	5ml*4	用于V-P試驗(yàn)
HB8282	硝酸鹽還原試劑盒	5ml*4	用于硝酸鹽還原試驗(yàn)
HB0123	1%亞碲酸鉀溶液1% Potassium Telluurite Solution	5ml*10支	與亞碲酸鈉培養(yǎng)基基礎(chǔ)配套使用
HB8284	萋-尼氏染色液Ziehl-neelsen stain kit	5ml*6	用于細(xì)菌抗酸染色
HB8285	金胺O染色液Auramine O stain kit	5ml*6	用于細(xì)菌抗酸染色
HB8300-3	芽孢染色液（醫(yī)療）（5-25℃）	5ml*4支/盒	用于芽孢染色
HB8278-3	革蘭氏染色液（醫(yī)療） Gram Stain Kit	5ml*8支/盒	用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)
HB0103	4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)4-Methylumbelliferyl-Beta-D-Glucuronide	0.1g	0.01g添加于100ml HB0146（LST-MUG）中,，用于O157鑒定
HB8397-2	吉姆薩染色液（5-25℃）（醫(yī)療）	5ml*4支/盒	用于血細(xì)胞、癥原蟲,、染色體染色
HB0384-52a	新生霉素（0.02mg）	0.02mg*5支/盒	每支添加于200ml HB0384-52 半胱氨酸鹽酸鹽,、萬古霉素和新生霉素的改良MRS培養(yǎng)基中
HB8744d	萬古霉素（2mg）	1ml*5支/盒	每200ml HB0384-52 半胱氨酸鹽酸鹽、萬古霉素和新生霉素的改良MRS培養(yǎng)基中加入萬古霉素0.2mg
HB4086e	碘液（36ml）	36ml*20瓶/盒	每支加入到1.8L TTB肉湯中
HB8286	瑞氏染色液	5ml*8	用于細(xì)胞瑞氏染色
HB0254	D-環(huán)絲氨酸	0.2g	每支過濾除菌后添加于500mlSC瓊脂基礎(chǔ)或500mlTSC中
HB8284-2	抗酸染色液（醫(yī)療）	5ml*6	用于細(xì)菌抗酸染色
HB8579a	STAA添加劑	1ml*5支	每支添加于200mlSTAA瓊脂培養(yǎng)基中
HB4086a	碘液Iodine solution	2ml*20	取一支添加于100mlTTB中或四硫磺酸鈉亮綠培養(yǎng)基或液體連四硫酸鹽培養(yǎng)基中
HB8397	姬姆薩染色液	5ml*4	用于血紅細(xì)胞等染色
HB8301	莢膜染色液	5ml*4	用于莢膜染色
HB8298-1	劉榮標(biāo)氏鞭毛染色液	5ml*8	用于鞭毛染色
HB8300-2	芽孢染色液(改良)	5ml*4	用于芽孢染色
HB8296	乳酸酚棉藍(lán)染色液	5ml*8	用于真菌染色
HB8295	50%卵黃乳液	5ml*10	作為添加劑添加于培養(yǎng)基中
HB8715b	多粘菌素B（5000IU）	5000IU/支*5	添加于200ml卵黃雙抗培養(yǎng)基(EPV)或液體雙抗增菌液中
HB8278	革蘭氏染色液試劑盒Gram Stain Kit	5ml*8	用于細(xì)菌的革蘭氏染色試驗(yàn)
HB8279	Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒Kovacs Indole Reagents Kit	5ml*2	用于吲哚（靛基質(zhì)）試驗(yàn)
HB8280	甲基紅試劑盒Methyl Red Reagents Kit	5ml*2	用于甲基紅試驗(yàn)
HBPP004	Andrade指示劑瓶裝（100ml）	100ml
HB8663a	新生霉素（125ug/支）Novobiocin	1ml/支*5	每支添加于225ml志賀氏增菌肉湯－新生霉素中
HB8689ad	假單胞菌CFC選擇性培養(yǎng)基添加劑(凍干粉)	1ml*5	每支添加于200ml假單胞菌CFC選擇性培養(yǎng)基中
GS069	0.4mg無菌硫代硫酸鈉水溶液	0.4mg/支*20	添加在水樣采集袋里使用
HB6271a	OADC添加劑	10ml*10支	用于添加于MiddleBrook7H11瓊脂和MiddleBrook7H10瓊脂
HB8725-1	Preston肉湯添加劑	1ml*5	此產(chǎn)品是HB8725培養(yǎng)基的添加劑,，每200ml加一支
GS070	無菌液體石蠟	1.7ml*20	覆蓋液體培養(yǎng)基用于厭氧培養(yǎng)
HB8884	美藍(lán),、伊紅、硼砂染色液	5ml*4支	用于蛔蟲卵染色實(shí)驗(yàn)
2100178	（水合）茚三酮Ninhydrin	5g/瓶	本品可用于3.5%（水合）茚三酮溶液等其他試劑的配制
HB8887a	JM瓊脂添加劑	1ml*5	作為HB8887JM瓊脂的添加劑使用
HB8886a	JM肉湯添加劑	1ml*5	作為HB8886 JM肉湯的添加劑使用
HB8744a	萬古霉素溶液（4mg）	1ml*5	作為HB8744 LAMVAB瓊脂的添加劑使用
HB0311a	萘啶酮酸3.0mg	3.0mg*5	作為HB0311 LIM培養(yǎng)基的添加劑使用
HB8888a	弓形菌瓊脂添加劑	1ml*5	作為HB8888弓形菌瓊脂的添加劑使用
HB8663b	新生霉素50ug	50ug/支*5	每支添加于HBJ8663-90 含90ml志賀氏菌增菌肉湯均質(zhì)袋
HB4160i	萘啶酮酸9.0mg	1ml*5	作為HB4186緩沖李氏菌增菌肉湯的添加劑使用
HB0310a	氯化血紅素	1ml*5	作為?HB0310?CDC厭氧菌瓊脂的添加劑
HB0310b	維生素K1（2mg）	1ml*5	作為?HB0310?CDC厭氧菌瓊脂的添加劑
HB8775a	土霉素添加劑（凍干粉）	20mg*5支/盒	作為添加劑使用
HB7039b	TM 抑菌劑	2ml*5	作為HB7039TM培養(yǎng)基的添加劑使用
HB8298-2	鞭毛染色液 Flagellum Staining Solution	5ml*8支	用于細(xì)菌鞭毛染色
HB9139	盧戈氏碘液	5ml*4支	用于淀粉水解試驗(yàn)
JX3400094	氧化酶試劑（1g）Oxidase	1g	用于微生物實(shí)驗(yàn)
HB9118a	慶大霉素（1mg）Gentamycin	1ml*5支	每支添加于100mlHB9118或HB9119
HB9119a	多粘菌素B（6萬單位）Polycolisttin B	1ml*5支	用于HB9119含多粘菌素B,、慶大霉素的BCSA瓊脂的添加劑使用
HB8783	班氏試劑	5ml/支*2	用于檢測(cè)是否還原糖

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國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：GB 8538-2022《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 飲用天然礦泉水檢驗(yàn)方法》解讀

適用范圍

適用于飲用天然礦泉水中產(chǎn)氣莢膜梭菌的確證試驗(yàn)及計(jì)數(shù)檢測(cè),，明確規(guī)定了乳糖-明膠生化管在微生物檢驗(yàn)中的應(yīng)用場(chǎng)景[3]。

核心檢測(cè)方法

采用穿刺接種法：取FTG培養(yǎng)液預(yù)培養(yǎng)的菌液50μL接種至乳糖-明膠培養(yǎng)基,，36℃±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí)后觀察產(chǎn)酸產(chǎn)氣現(xiàn)象,，4℃冷卻判定明膠液化狀態(tài)[3],。

檢出限與定量限

產(chǎn)氣莢膜梭菌的檢出限為1CFU/50mL，定量限為10CFU/mL,，通過培養(yǎng)后的產(chǎn)氣量及液化程度實(shí)現(xiàn)半定量分析[3],。

質(zhì)控樣品要求

需同步進(jìn)行陽性對(duì)照（產(chǎn)氣莢膜梭菌標(biāo)準(zhǔn)菌株）和陰性對(duì)照（無菌生理鹽水），陽性管應(yīng)呈現(xiàn)產(chǎn)酸產(chǎn)氣且明膠液化,，陰性管保持培養(yǎng)基原色及凝固狀態(tài)[3],。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 培養(yǎng)基預(yù)處理：避光保存，使用前需平衡至室溫
2. 無菌穿刺接種：垂直刺入培養(yǎng)基2/3深度
3. 培養(yǎng)觀察：需記錄每小時(shí)產(chǎn)氣量變化
4. 低溫判定：培養(yǎng)后4℃靜置1小時(shí)判定明膠液化[3]

特別說明

1. 培養(yǎng)基開封后需立即使用,，剩余部分應(yīng)密封避光保存
2. 培養(yǎng)過程需保持西林瓶半加塞狀態(tài)以保證需氧環(huán)境
3. 明膠液化判定需在4℃條件下完成,，常溫觀察會(huì)導(dǎo)致假陰性[3]

[3] 2022版GB 8538主要修訂變化解讀

以上信息僅供參考，請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn),！