硝酸鹽還原試劑盒/用于硝酸鹽還原試驗(SN079)
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CASO瓊脂
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(含纖維二糖)
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HL-1細胞專用培養(yǎng)基
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試劑盒組成:
組成
別名
規(guī)格
配制依據(jù)
溶液A
對甲基苯磺酸溶液
5ml*2
在1000mL 5mol/L乙酸中溶解8g對氨基苯磺酸
溶液B
α-萘酚乙酸溶液
5ml*2
在1000mL 5mol/L乙酸中溶解5g α-萘酚
反應原理:
蛋白胨和牛肉粉提供碳源,、氮源,、維生素和生長因子,;某些細菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽、氨或氮氣,。滴加硝酸鹽還原試劑后若試驗菌培養(yǎng)物中有亞硝酸鹽,可與乙酸,、對苯氨基苯磺酸和α-萘酚反應生成紅色的N-α-苯胺偶氮苯磺酸,。若試驗菌可利用硝酸鹽產(chǎn)亞硝酸鹽進一步轉(zhuǎn)化為氮氣,則小倒管中會有氣體囤積,,判定為陽性,。若試驗菌可將亞硝酸鹽轉(zhuǎn)化為氨,,則滴加硝酸鹽還原試劑呈無色反應,此時需加入適量鋅粉證明培養(yǎng)物中是否有未被利用的硝酸鹽存在,,若加入鋅粉后為無色則證明無硝酸鹽,,則可判斷為陽性。試驗菌不利用硝酸鹽,,滴加硝酸鹽還原試劑后為無色,,加入鋅粉后變?yōu)榧t色,證明培養(yǎng)物中有未被利用的硝酸鹽被鋅粉還原為亞硝酸鹽產(chǎn)生紅色反應,,此時判斷為陰性,。
操作步驟:
1.培養(yǎng)物接種于硝酸鹽肉湯,36±1℃培養(yǎng)1-5天,。
2.加入溶液A和溶液B各2-3滴,,混勻。
3.立即觀察結(jié)果,,也可以放置室溫2-5分鐘觀察結(jié)果,。
結(jié)果判斷:
陽性反應:紅色。
陰性反應:不變色(無紅色出現(xiàn))
注:如出現(xiàn)陰性結(jié)果,,可再加入鋅粉少許,,若出現(xiàn)紅色,則鑒定為陰性結(jié)果,,若不變色則為陽性結(jié)果,。
硝酸鹽還原試劑盒微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養(yǎng)基,,接種以下質(zhì)控菌株,放置/℃/培養(yǎng)/小時,。
以上信息僅供參考,,請以實物批次為準!
一,、適用范圍
二,、核心檢測方法
三,、檢出限與定量限
四、質(zhì)控樣品要求
五,、關鍵實驗步驟
2. 加樣:依次加入待測樣本、酶標抗體,;
3. 孵育:37℃避光反應60分鐘,;
4. 洗滌:去除未結(jié)合物質(zhì);
5. 顯色:加入TMB底液,,終止反應后讀取OD值[1],。
六,、特別說明
2. 顯色時間需嚴格控制,,終止后10分鐘內(nèi)完成讀數(shù);
3. 高濃度樣本需預稀釋,,避免鉤狀效應[1],。
以上信息僅供參考,請以相應標準的原文為準,!