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莢膜染色液/用于莢膜染色（SN079）

HB8301

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5ml*4

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莢膜染色液介紹：

莢膜染色液說明書

[規(guī)格]：5ml*4

[試劑盒組成]：

溶液A：結(jié)晶紫染色液

溶液B：20%硫酸銅水溶液

[使用方法]：

1.涂片：按常規(guī)法涂片,，可多挑些菌體與水充分混合,，并將粘稠的菌液盡量涂開，但涂布的面積不宜過大,。

2.干燥：在空氣中自然干燥,。

3.染色：用溶液A染5-7分鐘。

4.脫色：用溶液B洗去結(jié)晶紫,，脫色要適度（沖洗2遍）,。用吸水紙吸干，并立即加1-2滴香柏油于涂片處,，以防止CuSO₄結(jié)晶的形成,。鏡檢。

[結(jié)果觀察]：背景無色或淺紫色,，菌體紫色,，莢膜無色或淺紫色。

[注意事項]：

1.脫色時不可用水沖洗,，必須用乙液,。

2.不能加熱干燥或固定涂片，以避免水沖洗玻片,，防止莢膜皺縮或脫失,。

檢驗原理：

莢膜是細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層粘液性多糖類物質(zhì)，其對染料的親和力較弱,，因此不容易著色,，通常采用負(fù)染色法染色，讓菌體和背景著色而莢膜不著色,，從而使菌體周圍呈現(xiàn)透明圈,。由于莢膜本身含水量較多，質(zhì)地疏松且單薄,，因此在染色的時候不能加熱固定,，以免莢膜受熱皺縮變形。莢膜染色可用于肺炎鏈球菌,、流感嗜血桿菌,、炭疽芽孢桿菌以及產(chǎn)氣莢膜梭菌的鑒定。

肺炎鏈球菌染色結(jié)果：

莢膜染色液微生物靈敏度試驗:

按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置/℃/培養(yǎng)/小時。

莢膜染色液的使用方法及結(jié)果判定：

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1. 適用范圍

適用于細(xì)菌莢膜的染色觀察,，特別是科研領(lǐng)域中對肺炎鏈球菌,、炭疽芽胞桿菌等有莢膜細(xì)菌的鑒別與分型分析。本方法通過特殊染色使莢膜與菌體呈現(xiàn)明顯對比,，便于顯微鏡下觀察[1],。

2. 核心檢測方法

采用Hiss法（硫酸銅染色法）：
1. 細(xì)菌涂片自然干燥后乙醇固定；
2. 滴加Hiss染色液加熱至微蒸汽產(chǎn)生,；
3. 硫酸銅溶液沖洗后直接干燥鏡檢,。染色后莢膜呈藍(lán)紫色，菌體深藍(lán)色[1][2],。

3. 檢出限與定量限

未明確提及具體數(shù)值,，但要求樣本濃度適中。濃度過低可能導(dǎo)致鏡下難以識別,，建議通過預(yù)實驗優(yōu)化涂片厚度及染色時間[1][2],。

4. 質(zhì)控樣品要求

1. 使用已知莢膜陽性的標(biāo)準(zhǔn)菌株（如肺炎鏈球菌）作為陽性對照；
2. 染色液開封后需在6個月內(nèi)使用完畢,，避免揮發(fā)或變質(zhì)；
3. 存儲時避光,，室溫保存,，出現(xiàn)沉淀需過濾或棄用[1][2]。

5. 關(guān)鍵實驗步驟

1. 涂片需均勻且厚度適宜,，避免過厚影響觀察,；
2. 加熱染色液時需控制溫度，避免沸騰導(dǎo)致染色不均,；
3. 沖洗步驟僅用硫酸銅溶液,，不可用水沖洗；
4. 干燥后優(yōu)先使用油鏡觀察以提高分辨率[1][2],。

6. 特別說明

1. 本方法僅限科研用途,，不適用于臨床診斷；
2. 操作時需避免染色液接觸皮膚或黏膜,；
3. 染色后需及時觀察,，長期存放可能導(dǎo)致褪色；
4. 對于新型隱球菌等特殊菌種,，建議采用墨汁負(fù)染法輔助驗證[1][2][5],。

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