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丙酸鹽（枯草芽孢桿菌）/用于枯草芽孢桿菌生化試驗(yàn)（GB180/GB/T 26428-2010）

GB180

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丙酸鹽（枯草芽孢桿菌）介紹：

用途：用于枯草芽孢桿菌生化試驗(yàn),。

結(jié)果判斷：

編號(hào)	產(chǎn)品名稱	結(jié)果判斷		培養(yǎng)時(shí)間	備注
		陽(yáng)性	陰性
GB180	丙酸鹽（枯草芽孢桿菌）	?藍(lán)色	綠色	24-48

參考標(biāo)準(zhǔn)：

試管開關(guān)操作圖：

丙酸鹽（枯草芽孢桿菌）相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說明及用途
HB9204	液化GYE瓊脂培養(yǎng)基Liquefaction GYE Agar Medium	250g	用于凝結(jié)芽孢桿菌的計(jì)數(shù)培養(yǎng)
HB0248	甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)（MYP）Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的固體平板計(jì)數(shù)（GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
HB0250	改良V-P培養(yǎng)基V-P Medium,Modified	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的V-P試驗(yàn)
HB0251-1	胰酪胨大豆羊血（TSSB）瓊脂Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的溶血測(cè)試實(shí)驗(yàn)
HB0252	酪蛋白瓊脂Casein Agar	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)
HB9258	檢測(cè)培養(yǎng)基Detection Medium	250g	用于凝結(jié)芽孢桿菌計(jì)數(shù)和培養(yǎng)
HB9195	酸水解酪蛋白胰蛋白胨（HCT）瓊脂培養(yǎng)基Hydrolysate 0f Casein Tryptone(HCT)Agar Medium	250g	用于檢測(cè)蘇云金桿菌的伴孢晶體
HB9219	葡萄糖酵母瓊脂培養(yǎng)基Glucose Yeast Agar Medium	250g	用于凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)
HBPM0251	胰酪胨大豆羊血瓊脂（TSSB）平板（9cm）(2-8℃)	9cm*5/包	用于蠟樣芽胞桿菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗(yàn)
HB9259	甘露醇卵黃多粘菌素肉湯Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Broth	250g	用于蠟樣芽孢桿菌選擇性增菌培養(yǎng)
HB8925-1	凝結(jié)芽孢桿菌檢測(cè)培養(yǎng)基Coagulation Bacillus Detection Medium	250g	用于凝結(jié)芽孢桿菌培養(yǎng)
HBPT8501	NAC液體培養(yǎng)基管（9ml）NAC Solid Medium	9ml*20	用于綠膿假單胞菌的增菌培養(yǎng)
HBPT8501-1	NAC液體培養(yǎng)基管（9ml） NAC Solid Medium	9ml*20	用于綠膿假單胞菌的增菌培養(yǎng)
HB9107	枯草芽孢桿菌孢子培養(yǎng)基	250g	用于制備枯草芽孢桿菌的孢子
HB9223	枯草芽孢桿菌增菌培養(yǎng)基	250g	用于枯草芽孢桿菌增菌培養(yǎng)
HB0276	酚紅葡萄糖肉湯Phenol Red Dextrose Broth	250g	用于蠟樣芽孢桿菌葡萄糖分解試驗(yàn)
HB0277	硝酸鹽肉湯Nitrate Broth	250g	用于蠟樣芽孢桿菌硝酸鹽還原試驗(yàn)
HB0278	動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基（A法）Motility Nitrate Medium	250g	用于細(xì)菌的動(dòng)力試驗(yàn)和硝酸鹽還原試驗(yàn)
HB0279	木糖-明膠培養(yǎng)基	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的木糖利用和明膠液化試驗(yàn)
HB0280	蠟樣芽孢桿菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)Bacilus Cereus Selective Agar Base	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的選擇性分離培養(yǎng)
HB0281	葡萄糖酪胨瓊脂Dextrose Casein-peptone Agar	250g	用于食品中臘樣芽孢桿菌鑒定和計(jì)數(shù)（APHA方法）
HB8925	凝結(jié)芽孢桿菌計(jì)數(shù)培養(yǎng)基Coagulation Bacillus Count Medium	250g	用于凝結(jié)芽孢桿菌的計(jì)數(shù)培養(yǎng)
HB0248a	多粘菌素B（1萬(wàn)單位）Polymyxin B	1萬(wàn)單位*5支	添加于100mlHB0249或HB0280或HB0248-1或HB0248中
HB8699	溶菌酶肉湯基礎(chǔ)Lysozyme Broth Base	250g	用于蠟樣芽孢桿菌的溶菌酶試驗(yàn)
1001339-1	脫纖維羊血Off fiber sheep blood	50ml	每100mlHB0251中加入7ml脫纖維羊血
HB0249b	多粘菌素B（2.25萬(wàn)單位）	2.25萬(wàn)單位*5支	每支添加于225ml胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)中
HBJ016	含225mL胰酪胨大豆多粘菌素肉湯均質(zhì)袋	10個(gè)/盒	用于蠟樣芽孢桿菌的前增菌培養(yǎng)（GB)
GB179	D-甘露醇發(fā)酵管（枯草芽孢桿菌）	20支	用于枯草芽孢桿菌生化試驗(yàn)
HB0249-1	胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ)Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base	250g	用于蠟樣芽孢桿菌選擇性的增菌培養(yǎng)
HB8480	肝湯Liver Broth	250g	用于嗜熱菌芽孢的鑒別培養(yǎng)
HB8500	NAC瓊脂培養(yǎng)基NAC Agar Medium	250g	用于綠膿假單胞菌的分離培養(yǎng)
HB8501	NAC液體培養(yǎng)基NAC Solid Medium	250g	用于綠膿假單胞菌的增菌培養(yǎng)
HB8538	NGKG寒天基礎(chǔ)培地NGKG Medium	250g	用于食品中蠟樣芽孢桿菌分離培養(yǎng)
HB8699a	0.1%溶菌酶溶液	1ml*5	每支添加于99ml溶菌酶肉湯基礎(chǔ)中
HB8834	鄰單胞菌鑒別瓊脂Plesiomomas Differential Agar	250g	用于鄰單胞菌的分離培養(yǎng)
HB8699-1	溶菌酶營(yíng)養(yǎng)肉湯Lysozyme Nutrient Broth	250g	用于蠟樣芽胞桿菌溶菌酶試驗(yàn)（GB4789.14-2014）
HB4177-1	硫酸錳營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基Manganese Nutrient Agar Medium	250g	用于需氧芽孢桿菌的芽孢培養(yǎng)
HB4168-6	動(dòng)力培養(yǎng)基Motility Test Medium	250g	用于動(dòng)力試驗(yàn)
GB008-1	動(dòng)力培養(yǎng)基	20支/盒	用于蠟樣芽胞桿菌的檢測(cè)（SN標(biāo)準(zhǔn)）
HBPM0252	酪蛋白瓊脂平板（9cm)Casein Agar Plate	9cm*10個(gè)/包	用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)
HB0115-1	西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基Simmons Citrate Medium	250g	用于蠟樣芽孢桿菌利用檸檬酸鹽試驗(yàn)
HB8769	0.5%堿性復(fù)紅溶液	5ml*4	作為蠟樣芽孢桿菌蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗(yàn)用的染色液使用

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GB/T 26428-2010 飼用微生物制劑中枯草芽孢桿菌的檢測(cè)

適用范圍	本標(biāo)準(zhǔn)適用于飼用微生物制劑中枯草芽孢桿菌的檢測(cè)和計(jì)數(shù)，包括粉劑,、液體等形態(tài)的制劑[7],。

核心檢測(cè)方法

采用稀釋涂布法：
1. 樣品用0.85%滅菌生理鹽水稀釋；
2. 接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（NA）,，37℃培養(yǎng)24小時(shí),；
3. 通過革蘭氏染色、7%氯化鈉耐受性及生化試驗(yàn)（V-P反應(yīng),、硝酸鹽還原等）鑒定菌種[7],。

檢出限與定量限

定量限為1×103 CFU/g（或mL），檢測(cè)結(jié)果按稀釋倍數(shù)計(jì)算活菌濃度,，修約規(guī)則遵循GB/T 8170[7],。

質(zhì)控樣品要求

1. 采樣需符合GB/T 14699.1，確保代表性,；
2. 樣品制備按GB/T 20195進(jìn)行均質(zhì)處理,；
3. 平行試驗(yàn)至少設(shè)置3個(gè)稀釋度，每個(gè)梯度重復(fù)3次[7],。

關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟

1. 涂布法接種：取0.1mL稀釋液均勻涂布于NA平板,；
2. 培養(yǎng)條件：37℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-24小時(shí)；
3. 染色鑒定：革蘭氏染色呈紫色陽(yáng)性,，顯微鏡觀察芽孢形態(tài),；
4. 生化驗(yàn)證：V-P反應(yīng)呈紅色、硝酸鹽還原陽(yáng)性[7],。

特別說明	1. 雜菌干擾處理：若樣品含其他微生物,，需增加選擇性培養(yǎng)基； 2. 結(jié)果判定：僅計(jì)數(shù)典型枯草芽孢桿菌菌落（圓形,、灰白色,、邊緣整齊）； 3. 安全性：實(shí)驗(yàn)廢棄物需高壓滅菌處理[7],。

[7] GB/T 26428-2010 飼用微生物制劑中枯草芽孢桿菌的檢測(cè)

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