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硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基/用于需氧芽孢桿菌的芽孢培養(yǎng)（GB179/GB180/GB4789.14-2014/GB008-1）

HB4177-1

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硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基介紹：

用途：用于需氧芽孢桿菌的芽孢培養(yǎng)。

成分（g/L）：

硫酸錳	0.0308
胰蛋白胨	5.0
酵母浸粉	5.0
葡萄糖	5.0
磷酸氫二鉀	4.0
瓊脂	13.0
pH值7.2±0.2	25℃

用法：

稱取本品32.03g,，加熱溶解于1000ml蒸餾水中,，分裝，121℃高壓滅菌15分鐘,，備用。

注：培養(yǎng)基中含少量硫酸錳,，滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀,。

檢驗原理：

胰蛋白胨和酵母浸粉作為培養(yǎng)基中的基礎(chǔ)營養(yǎng)物質(zhì)，提供細菌生長所需的碳氮源,、維生素和其他的生長因子,；葡萄糖為可發(fā)酵糖類；磷酸二氫鉀作為培養(yǎng)基的緩沖劑,；硫酸錳可促進芽孢的生成,；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。

不同細菌在硫酸錳營養(yǎng)瓊脂上的生長特征：

硫酸錳營養(yǎng)瓊脂原理和使用方法：

硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 微生物靈敏度試驗:

按標簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置30±1℃需氧培養(yǎng)24±2小時。

硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基同名產(chǎn)品推薦：

HBPM4177-1 硫酸錳營養(yǎng)瓊脂平板（9cm） 9cm*10個/包

硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品貨號	產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品規(guī)格	產(chǎn)品說明及用途
HB9204	液化GYE瓊脂培養(yǎng)基Liquefaction GYE Agar Medium	250g	用于凝結(jié)芽孢桿菌的計數(shù)培養(yǎng)
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HBPM0251	胰酪胨大豆羊血瓊脂（TSSB）平板（9cm）(2-8℃)	9cm*5/包	用于蠟樣芽胞桿菌的分離,、培養(yǎng)和溶血試驗
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HBJ016	含225mL胰酪胨大豆多粘菌素肉湯均質(zhì)袋	10個/盒	用于蠟樣芽孢桿菌的前增菌培養(yǎng)（GB)
GB179	D-甘露醇發(fā)酵管（枯草芽孢桿菌）	20支	用于枯草芽孢桿菌生化試驗
GB180	丙酸鹽（枯草芽孢桿菌）	20支	用于枯草芽孢桿菌生化試驗
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HB8699-1	溶菌酶營養(yǎng)肉湯Lysozyme Nutrient Broth	250g	用于蠟樣芽胞桿菌溶菌酶試驗（GB4789.14-2014）
HB4168-6	動力培養(yǎng)基Motility Test Medium	250g	用于動力試驗
GB008-1	動力培養(yǎng)基	20支/盒	用于蠟樣芽胞桿菌的檢測（SN標準）
HBPM0252	酪蛋白瓊脂平板（9cm)Casein Agar Plate	9cm*10個/包	用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗
HB0115-1	西蒙氏檸檬酸鹽培養(yǎng)基Simmons Citrate Medium	250g	用于蠟樣芽孢桿菌利用檸檬酸鹽試驗
HB8769	0.5%堿性復(fù)紅溶液	5ml*4	作為蠟樣芽孢桿菌蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶試驗用的染色液使用

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GB 4789.14-2014 標準解讀

適用范圍

本標準適用于食品中蠟樣芽胞桿菌的分離與鑒定,，包括蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶體檢測。硫酸錳營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基用于促進芽胞形成及毒素結(jié)晶體的觀察[3][9],。

核心檢測方法

方法要點

通過選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)后,，觀察菌落形態(tài)、芽胞形成及蛋白質(zhì)毒素結(jié)晶體的特征性結(jié)構(gòu),。需結(jié)合生化試驗（如溶血試驗,、動力試驗）進行綜合鑒定[3][9]。

檢出限與定量限

檢測靈敏度

培養(yǎng)基對目標菌株的最低檢出限為1 CFU/g（按標準稀釋法操作）,，定量限需結(jié)合菌落計數(shù)方法,，確保可重復(fù)性符合國標要求[3][9],。

質(zhì)控樣品要求

質(zhì)控菌株

需使用蘇云金芽胞桿菌（ATCC10792）和蠟樣芽胞桿菌（ATCC63301）作為陽性對照,，驗證培養(yǎng)基的促芽胞形成能力及毒素結(jié)晶體特征[3][9],。

關(guān)鍵實驗步驟

操作流程

1. 樣品預(yù)處理：按標準進行均質(zhì)和梯度稀釋。
2. 接種培養(yǎng)：取稀釋液涂布于硫酸錳營養(yǎng)瓊脂平板,，30℃±1℃培養(yǎng)24h后室溫放置3-4天,。
3. 鏡檢觀察：挑取典型菌落進行革蘭染色及芽胞、結(jié)晶體形態(tài)學(xué)鑒定[3][9],。

特別說明

注意事項

- 培養(yǎng)基配制后需121℃高壓滅菌15分鐘,，避免過度加熱導(dǎo)致成分降解。
- 實驗廢棄物需經(jīng)121℃高壓滅菌30分鐘后再處理,，防止生物污染[3][9],。

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