營養(yǎng)瓊脂（NA）/用于一般細(xì)菌培養(yǎng)、轉(zhuǎn)種,、復(fù)壯和增菌等（GB4789.28-2024/GB/T5750.12-2023）
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用途：用于一般細(xì)菌培養(yǎng),、轉(zhuǎn)種、復(fù)壯和增菌等,。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理：
蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源,、維生素和生長(zhǎng)因子等其他營養(yǎng)物質(zhì)；氯化鈉用于維持培養(yǎng)基的滲透壓,；瓊脂為凝固劑,。
用法：
稱取本品33.0g，加熱溶解于1000ml蒸餾水中,，分裝三角瓶,，121℃高壓滅菌15分鐘，備用,。
外觀： 干粉培養(yǎng)基為淡黃色粉末,。 制備好的培養(yǎng)基為淡黃色透明固態(tài)。注意事項(xiàng)： 本品僅限于實(shí)驗(yàn)室使用,。干粉培養(yǎng)基出現(xiàn)過期,、結(jié)塊或變色，請(qǐng)勿使用,。保存條件和保質(zhì)期： 干粉培養(yǎng)基在5-30℃下干燥避光保存,，其保質(zhì)期為三年。制備好的培養(yǎng)基須在2-8℃干燥避光保存,。參考文獻(xiàn)： 1. GB4789.28-2024 中華人民共和國食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求,。 2. GB/T5750.12-2023 中華人民共和國生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法 微生物指標(biāo)。不同細(xì)菌在營養(yǎng)瓊脂上的生長(zhǎng)特征：
營養(yǎng)瓊脂（NA）微生物靈敏度試驗(yàn)：
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置36±1℃需氧培養(yǎng)24小時(shí)。
以上信息僅供參考,，請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn)！
一,、國家標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.28-2013 解讀
適用于食品微生物學(xué)檢驗(yàn)中培養(yǎng)基的質(zhì)量控制,，包含營養(yǎng)瓊脂的制備與性能驗(yàn)證，用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定,、菌種傳代及純培養(yǎng)[6],。
采用傾注平板法：將樣品稀釋液與冷卻至45℃的NA培養(yǎng)基混合，凝固后倒置培養(yǎng)（36±1℃, 24-48h）,，通過菌落形態(tài)和計(jì)數(shù)判定結(jié)果[6][8],。
標(biāo)準(zhǔn)要求培養(yǎng)基需支持目標(biāo)菌落形成單位（CFU）≥70%的回收率，定量限通常為30-300 CFU/平板,，檢出限取決于樣品稀釋梯度（最低1 CFU/g）[6][8],。
需使用標(biāo)準(zhǔn)菌株（如大腸埃希氏菌ATCC 25922、金黃色葡萄球菌ATCC 6538）進(jìn)行培養(yǎng)基靈敏度驗(yàn)證,，菌落形態(tài)應(yīng)典型且生長(zhǎng)率達(dá)標(biāo)[6],。
1. 稱取33g干粉溶于1L蒸餾水，加熱煮沸滅菌（121℃, 15min）
2. 冷卻至45-50℃傾注無菌平皿
3. 樣品梯度稀釋（10-1至10-6）后接種
4. 倒置培養(yǎng)后計(jì)數(shù)有效菌落[6][8],。
pH需嚴(yán)格控制在7.3±0.1（25℃）,，滅菌后避免反復(fù)加熱；出現(xiàn)結(jié)塊或變色的干粉應(yīng)棄用[6][8],。
二,、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) GB/T 4789.2-2003 解讀
食品微生物學(xué)檢驗(yàn)中菌落總數(shù)測(cè)定，明確營養(yǎng)瓊脂作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基的應(yīng)用場(chǎng)景及驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)[8],。
采用活菌計(jì)數(shù)法：樣品經(jīng)均質(zhì)稀釋后,，選擇3個(gè)連續(xù)稀釋度接種NA平板，培養(yǎng)后選取30-300 CFU的平板作為有效計(jì)數(shù)范圍[8],。
每批次培養(yǎng)基需進(jìn)行無菌試驗(yàn)（37℃培養(yǎng)24h無污染）和生長(zhǎng)試驗(yàn)（接種標(biāo)準(zhǔn)菌株后菌落形態(tài)清晰）[8],。
1. 樣品預(yù)處理（25g+225mL生理鹽水）
2. 梯度稀釋時(shí)需更換吸管避免交叉污染
3. 培養(yǎng)后需48h內(nèi)完成計(jì)數(shù)[8]。
三,、其他相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)概要
規(guī)定一次性衛(wèi)生用品微生物檢測(cè)中NA培養(yǎng)基的使用規(guī)范,，要求細(xì)菌菌落總數(shù)≤200 CFU/g[8]。
以上信息僅供參考，請(qǐng)以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn),！