木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂(GB4789.4-2024標(biāo)準(zhǔn))/用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)
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MH瓊脂即用型平板
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CASO瓊脂
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含纖維二糖)
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HL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基
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改良MRS瓊脂即用型平板
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用途:用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng),。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
酵母浸粉為細(xì)菌生長提供維生素和輔助因子,,木糖、乳糖和蔗糖作為可發(fā)酵碳源,。除志賀氏菌外,,其他大多數(shù)腸桿菌均發(fā)酵木糖,,加入賴氨酸是為了鑒別沙門氏菌。沙門氏菌發(fā)酵木糖產(chǎn)酸,,形成的酸性環(huán)境有利于該菌產(chǎn)生脫羧酶,,沙門氏菌使賴氨酸脫羧,從而使培養(yǎng)基的pH 升高向堿性轉(zhuǎn)變,,但這種轉(zhuǎn)變可因其他菌發(fā)酵乳糖和蔗糖產(chǎn)生大量的酸而被阻止,。
在堿性的條件下,硫代硫酸鈉及檸檬酸鐵銨與沙門氏菌產(chǎn)生的硫化氫反應(yīng),,使得菌落的顏色呈黑色,;但當(dāng)酸性條件下時(shí),,這種反應(yīng)被抑制,。苯酚紅作為酸堿指示劑,氯化鈉維持體系滲透壓平衡,,去氧膽酸鹽抑制革蘭氏陽性菌的生長,。
用法:
稱取本品57g,加熱煮沸攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,勿過度加熱,勿高壓滅菌。冷至48℃±2℃時(shí),傾入無菌平皿,部分開蓋,干燥后蓋上,備用,。
不同細(xì)菌在XLD培養(yǎng)基上的生長特征:
腸炎沙門氏菌CMCC50760
無色菌落,有黑心
大腸埃希氏菌ATCC25922
黃色菌落
福氏志賀氏菌CMCC51572
無色菌落,,無黑心
甲型副傷寒沙門菌CMCC50093
無色菌落,,無黑心
奇異變形桿菌CMCC49005
黃色菌落,有黑心
鼠傷寒沙門氏菌ATCC14028
無色菌落,,有黑心
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GB 4789.4-2024 標(biāo)準(zhǔn)解讀
1. 前增菌:使用緩沖蛋白胨水(BPW)進(jìn)行非選擇性增菌。
2. 選擇性增菌:采用四硫磺酸鈉煌綠(TTB)或亞硒酸鹽胱氨酸(SC)培養(yǎng)基,。
3. 分離培養(yǎng):在XLD瓊脂平板上劃線,,36℃±1℃培養(yǎng)18-24小時(shí),觀察典型菌落特征[8],。
2. 陰性對照:使用非目標(biāo)菌(如大腸埃希氏菌ATCC 25922),。
3. 質(zhì)控頻率:每批次實(shí)驗(yàn)需同步進(jìn)行對照實(shí)驗(yàn),,培養(yǎng)基需符合性能驗(yàn)證要求[8]。
2. 增菌培養(yǎng):36℃±1℃培養(yǎng)8-18小時(shí)后轉(zhuǎn)種至TTB或SC培養(yǎng)基,。
3. 分離培養(yǎng):在XLD瓊脂上挑取可疑菌落(無色半透明帶黑心或全透明)。
4. 生化鑒定:三糖鐵瓊脂(TSI),、賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)等[8],。
2. 培養(yǎng)基質(zhì)量控制:XLD瓊脂應(yīng)確保脫氧膽酸鈉含量及pH值符合標(biāo)準(zhǔn)(7.4±0.2),。
3. 結(jié)果判定:需結(jié)合血清學(xué)凝集試驗(yàn)(如O多價(jià)和H因子血清)確認(rèn)[8]。
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