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雙抗巧克力瓊脂培養(yǎng)基/用于嗜血桿菌和奈瑟菌的培養(yǎng)

HB8641

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250g

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操作視頻 | 雙抗巧克力瓊脂平版的制備方法

用途: 用于嗜血桿菌和奈瑟菌的培養(yǎng),。

添加劑：每瓶需配套添加 6盒 HB8641a 雙抗巧克力瓊脂添加劑和 1001339-1 脫纖維羊血，每200ml雙抗巧克力瓊脂培養(yǎng)基需添加1支 HB8641a 雙抗巧克力瓊脂添加劑和 7%的 1001339-1?脫纖維羊血（約14ml）。

成分(g/L)：

酪蛋白胨胰酶消化物	10.0
肉胃消化物	5.0
心胰酶消化物	3.0
酵母浸出粉	5.0
玉米淀粉	1.0
氯化鈉	5.0
瓊脂	12.0
pH值7.3 ± 0.2	25℃

檢驗原理：
各種消化物和酵母浸出粉提供碳氮源,、維生素和生長因子；淀粉能促進(jìn)奈瑟氏菌的生長,；氯化鈉維持均衡的滲透壓,；多粘菌素、萬古霉素抑制了革蘭氏陽性菌的生長,，更有利于嗜血桿菌和奈瑟菌的生長,；瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑；脫纖維羊血為苛養(yǎng)菌提供生長因子,。

用法：
稱取本品 44g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶每瓶 200ml,121℃高壓滅菌15分鐘,冷至 50℃左右時,每瓶加入7%無菌脫纖維羊血(約 14ml),，混勻,在 80℃水浴中加熱10min?左右(并不停搖動),直至培養(yǎng)基顏色變成棕色(巧克力色),冷至45-50℃時,加入一支雙抗巧克力瓊脂添加劑(含萬古霉素0.66mg,多粘菌素B 0.84mg),混勻,傾入無菌平皿,備用。

雙抗巧克力瓊脂基礎(chǔ)微生物靈敏度試驗:
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,，接種以下質(zhì)控菌株,，放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時。

操作視頻 | 雙抗巧克力瓊脂平版的制備方法-點擊查看實驗操作視頻

以上信息僅供參考,，請以實物批次為準(zhǔn),！

1. 適用范圍

雙抗巧克力瓊脂培養(yǎng)基主要用于嗜血桿菌和奈瑟菌的分離培養(yǎng)及增殖，適用于臨床微生物檢測,、食品衛(wèi)生檢驗等領(lǐng)域,。其配方設(shè)計滿足苛養(yǎng)菌對X因子和V因子的需求，通過高溫裂解紅細(xì)胞釋放生長因子[2][4],。

2. 核心檢測方法

檢測方法基于選擇性抑制原理,，添加萬古霉素和多粘菌素B抑制革蘭氏陽性菌，通過巧克力化處理（80℃水浴加熱）促進(jìn)目標(biāo)菌生長,。培養(yǎng)基需無菌分裝并添加5%-10%脫纖維羊血[3][4],。

3. 檢出限與定量限

該培養(yǎng)基對嗜血桿菌的檢出限為1 CFU/mL，定量限為10 CFU/mL,，滿足臨床樣本中低濃度病原體的檢測需求,。質(zhì)控菌株（如流感嗜血桿菌ATCC 10211）需呈現(xiàn)典型菌落形態(tài)[4]。

4. 質(zhì)控樣品要求

每批次培養(yǎng)基需進(jìn)行無菌試驗（35℃培養(yǎng)24-48h）和生長試驗,，使用標(biāo)準(zhǔn)菌株驗證性能,。質(zhì)控頻度為每次新配制時，菌落形態(tài)應(yīng)清晰可見（1.5-2mm）,，無雜菌污染[4][10],。

5. 關(guān)鍵實驗步驟

① 基礎(chǔ)成分溶解（44g/1000mL蒸餾水）；② 121℃高壓滅菌15分鐘,；③ 冷卻至50℃添加羊血并巧克力化處理,；④ 加入雙抗添加劑（萬古霉素和多粘菌素B）,；⑤ 傾注平板后2-8℃保存[3][4]。

6. 特別說明

① 培養(yǎng)基顏色需呈均勻巧克力棕色,；② 添加劑需現(xiàn)配現(xiàn)用,；③ 避免反復(fù)凍融；④ 失效表現(xiàn)為顏色異?；蛸|(zhì)控菌生長不良,；⑤ 存儲條件不符合可能導(dǎo)致V因子降解[3][4][10]。

以上信息僅供參考,，請以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)的原文為準(zhǔn),！