類桿菌-膽汁-七葉苷瓊脂(BBE)/用于脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)(GB/T 1741/GB162)
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MH瓊脂即用型平板
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含纖維二糖)
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CASO瓊脂
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改良MRS瓊脂即用型平板
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用途:用于脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
胰蛋白胨、大豆胨提供細(xì)菌生長的基本營養(yǎng),;氯化鈉維持滲透壓;較高含量的牛膽粉可抑制革蘭氏陽性菌的生長,,并能與氯化血紅素一同促進(jìn)脆弱擬桿菌的生長,;慶大霉素為光譜抗生素,對(duì)多數(shù)腸桿菌,、假單胞菌,、葡萄球菌、鏈球菌,、芽孢桿菌等有較強(qiáng)的抗菌活性,,可抑制多數(shù)雜菌的生長,可促進(jìn)脆弱擬桿菌的生長,;瓊脂為凝固劑,;七葉苷和檸檬酸鐵銨為指示劑,脆弱擬桿菌可分解七葉苷生成七葉素,與檸檬酸鐵銨反應(yīng)變黑,,使菌落呈現(xiàn)棕黑色,。
用法:
稱取本品61.6g,加熱煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,,121℃高壓滅菌15分鐘,,冷卻至50℃左右時(shí),傾入無菌平皿,,備用,。
注:培養(yǎng)基中有少量檸檬酸鐵銨、氯化血紅素,,滅菌后有少量沉淀,,搖勻倒平板即可。
注意事項(xiàng):
①培養(yǎng)基中含有的氯化血紅素在滅菌后易產(chǎn)生沉淀,,倒平板之前需充分進(jìn)行搖勻,。
②脆弱擬桿菌為厭氧菌,接觸氧氣容易死亡,,建議應(yīng)在厭氧工作臺(tái)中操作,;如在正常空氣中操作,,必須快速完整接種工作并立即轉(zhuǎn)移至厭氧環(huán)境中,,防止脆弱擬桿菌過量死亡。
脆弱擬桿菌在類桿菌-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂上的生長特征:
棕黑色菌落
類桿菌-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂微生物靈敏度試驗(yàn):按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,,接種以下質(zhì)控菌株,,放置36±1℃厭氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。
以上信息僅供參考,,請(qǐng)以實(shí)物批次為準(zhǔn)!
國家標(biāo)準(zhǔn)及行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)解讀
- 腸球菌檢測(cè):使用BEA瓊脂,通過膽汁耐受性和七葉苷水解能力篩選目標(biāo)菌[3],。
- 脆弱擬桿菌檢測(cè):使用BBE瓊脂,,依賴高濃度膽汁抑制非目標(biāo)菌,結(jié)合七葉苷水解特征判定目標(biāo)菌[6],。
- 定量限:需通過梯度稀釋法確定,通常為102~103 CFU/g,。
- 陰性對(duì)照:添加非目標(biāo)菌(如大腸桿菌)驗(yàn)證選擇性[6]。
- 樣品保存:需在1~4℃冷藏,,8小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)[3],。
- 接種培養(yǎng):取均質(zhì)液涂布于BBE/BEA瓊脂,,37℃厭氧/需氧培養(yǎng)24~48小時(shí),。
- 結(jié)果判讀:BBE瓊脂上黑色菌落(七葉苷水解)為可疑目標(biāo)菌[6]。
- 膽汁濃度需嚴(yán)格校準(zhǔn),過高會(huì)抑制目標(biāo)菌,,過低導(dǎo)致雜菌干擾,。
- 實(shí)驗(yàn)人員需具備生物安全二級(jí)(BSL-2)防護(hù)資質(zhì)[3][6],。
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