類桿菌-膽汁-七葉苷瓊脂(BBE)/用于脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)
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2216E海水瓊脂即用型平板
BNCC353703 | 見詳情
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酵母浸粉
BNCC385214 | 見詳情
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胰蛋白胨
BNCC385213 | 見詳情
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DSMZ231培養(yǎng)基
BNCC385128 | 見詳情
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含20%蔗糖的麥芽即用型平板
BNCC380934 | 見詳情
用途:用于脆弱擬桿菌群的分離培養(yǎng)。
成分(g/L)
檢驗原理:
胰蛋白胨、大豆胨提供細(xì)菌生長的基本營養(yǎng);氯化鈉維持滲透壓;較高含量的牛膽粉可抑制革蘭氏陽性菌的生長,并能與氯化血紅素一同促進(jìn)脆弱擬桿菌的生長;慶大霉素為光譜抗生素,對多數(shù)腸桿菌、假單胞菌、葡萄球菌、鏈球菌、芽孢桿菌等有較強的抗菌活性,可抑制多數(shù)雜菌的生長,可促進(jìn)脆弱擬桿菌的生長;瓊脂為凝固劑;七葉苷和檸檬酸鐵銨為指示劑,脆弱擬桿菌可分解七葉苷生成七葉素,與檸檬酸鐵銨反應(yīng)變黑,使菌落呈現(xiàn)棕黑色。
用法:
稱取本品61.6g,加熱煮沸溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻至50℃左右時,傾入無菌平皿,備用。
注:培養(yǎng)基中有少量檸檬酸鐵銨、氯化血紅素,滅菌后有少量沉淀,搖勻倒平板即可。
注意事項:
①培養(yǎng)基中含有的氯化血紅素在滅菌后易產(chǎn)生沉淀,倒平板之前需充分進(jìn)行搖勻。
②脆弱擬桿菌為厭氧菌,接觸氧氣容易死亡,建議應(yīng)在厭氧工作臺中操作;如在正常空氣中操作,必須快速完整接種工作并立即轉(zhuǎn)移至厭氧環(huán)境中,防止脆弱擬桿菌過量死亡。
脆弱擬桿菌在類桿菌-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂上的生長特征:
棕黑色菌落
類桿菌-膽汁-七葉苷(BBE)瓊脂微生物靈敏度試驗:按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃厭氧培養(yǎng)24-48小時。
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本公司銷售的所有產(chǎn)品僅供實驗科研使用,不用于人體及臨床診斷。
- 腸球菌檢測:使用BEA瓊脂,通過膽汁耐受性和七葉苷水解能力篩選目標(biāo)菌[3]。
- 脆弱擬桿菌檢測:使用BBE瓊脂,依賴高濃度膽汁抑制非目標(biāo)菌,結(jié)合七葉苷水解特征判定目標(biāo)菌[6]。
- 定量限:需通過梯度稀釋法確定,通常為102~103 CFU/g。
- 陰性對照:添加非目標(biāo)菌(如大腸桿菌)驗證選擇性[6]。
- 樣品保存:需在1~4℃冷藏,8小時內(nèi)完成檢測[3]。
- 接種培養(yǎng):取均質(zhì)液涂布于BBE/BEA瓊脂,37℃厭氧/需氧培養(yǎng)24~48小時。
- 結(jié)果判讀:BBE瓊脂上黑色菌落(七葉苷水解)為可疑目標(biāo)菌[6]。
- 膽汁濃度需嚴(yán)格校準(zhǔn),過高會抑制目標(biāo)菌,過低導(dǎo)致雜菌干擾。
- 實驗人員需具備生物安全二級(BSL-2)防護(hù)資質(zhì)[3][6]。
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