結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA) 即用型袋裝(200ml)/用于大腸菌群的固體平板檢測(cè)(GB,、SN標(biāo)準(zhǔn))(GB4789.28-2013)
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MH瓊脂即用型平板
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CASO瓊脂
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蛋白瘤胃球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(含纖維二糖)
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HL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基
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改良MRS瓊脂即用型平板
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產(chǎn)品特點(diǎn):
本品為海博新推出的袋裝即用型培養(yǎng)基,,是一種加熱滅菌好的成品培養(yǎng)基,,水浴加熱后可直接用于制備平板。
相較于干粉培養(yǎng)基,,省去了稱量,、溶解、滅菌等繁瑣的配制過(guò)程,,使用方法更方便快捷,;
相較于即用型平板培養(yǎng)基具有包裝簡(jiǎn)單,便于運(yùn)輸,,不易污染,,成本低等優(yōu)點(diǎn)。
用途:用于大腸菌群的固體平板檢測(cè),。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源,、維生素、生長(zhǎng)因子和輔酶等其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),;氯化鈉維持均衡的滲透,;乳糖為可發(fā)酵碳水化合物,可作為一種能量來(lái)源,;3號(hào)膽鹽可抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),;結(jié)晶紫對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌如葡萄球菌、 白喉?xiàng)U菌,,以及綠膿桿菌,、白念珠菌、表皮癬菌有殺滅作用,,對(duì)其他革蘭氏陰性菌和抗酸菌幾乎無(wú)作用,;中性紅為指示劑;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑,。
儲(chǔ)存條件及有效期
1.2-25℃保存,。
2.本產(chǎn)品在儲(chǔ)存條件下有效期為六個(gè)月,。
使用方法
將本品完整包裝放置于100℃沸水浴中加熱20-30min,待培養(yǎng)基至培養(yǎng)基完全溶解后冷卻至45℃~50℃時(shí),,撕開(kāi)外層包裝,,在無(wú)菌環(huán)境中擰開(kāi)蓋子,將培養(yǎng)基傾入無(wú)菌平皿中,,凝固后備用,。
注意事項(xiàng)
1.若出現(xiàn)污染、破損,、變色,、泄露等現(xiàn)象時(shí),則不能使用,。
2.水浴加熱過(guò)程中無(wú)需打開(kāi)外層包裝,,產(chǎn)品內(nèi)部有少量氣體受熱后出現(xiàn)膨脹為正常現(xiàn)象,。
3.使用后的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行消毒處理,。
4.本產(chǎn)品使用方法非強(qiáng)制性,如用戶有具體參考資料可進(jìn)行相應(yīng)調(diào)整,。不同細(xì)菌在結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂上的生長(zhǎng)特征:
大腸埃希氏菌
紫紅色菌落,,可有膽鹽沉淀環(huán)
弗氏檸檬酸桿菌
紫紅色菌落,可有膽鹽沉淀環(huán)
陰溝腸桿菌
紫紅色菌落,,可有膽鹽沉淀環(huán)
鼠傷寒沙門氏菌
粉紅色菌落,,無(wú)膽鹽沉淀環(huán)
結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)微生物靈敏度:
接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)18-24小時(shí),。
參考文獻(xiàn):
1.GB4789.28-2013 中華人民共和國(guó)食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求,。
2.Eaton A. D., Clesceri L. S. and Greenberg A. E., (Ed.), 1998, Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater,
20th Ed., American Public Health Association, Washington, D.C.
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GB/T 4789.3-2008 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 大腸菌群計(jì)數(shù)
適用于食品中大腸菌群的計(jì)數(shù)檢測(cè),包括乳制品,、肉制品等加工食品的微生物安全評(píng)估[9],。
核心檢測(cè)方法
采用VRBA培養(yǎng)基傾注平板法,通過(guò)選擇性抑制非目標(biāo)菌,,使大腸菌群形成典型深紅色菌落(直徑≥0.5mm)并伴隨膽鹽沉淀圈[9],。
檢出限與定量限
檢出限為1 CFU/g(mL),定量范圍10-100 CFU/平板,,超過(guò)300 CFU需稀釋后重新檢測(cè)[9],。
質(zhì)控樣品要求
需同步進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照(大腸埃希氏菌ATCC25922)和陰性對(duì)照(金黃色葡萄球菌ATCC6538),陽(yáng)性菌應(yīng)形成典型菌落,,陰性菌被完全抑制[9],。
關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣品均質(zhì)后梯度稀釋
2. VRBA加熱溶解后冷卻至45℃傾注
3. 雙層覆蓋法:首次傾注15mL混勻,凝固后追加3-4mL覆蓋
4. 36±1℃倒置培養(yǎng)18-24小時(shí)[9]
特別說(shuō)明
培養(yǎng)基配制后需在3小時(shí)內(nèi)使用,,滅菌過(guò)程會(huì)導(dǎo)致膽鹽分解,,嚴(yán)禁高壓滅菌。培養(yǎng)時(shí)間超過(guò)24小時(shí)可能導(dǎo)致菌落過(guò)度生長(zhǎng)影響計(jì)數(shù)[9],。
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