雙歧桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基/用于雙歧桿菌生化試驗(yàn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基
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M2培養(yǎng)基
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雙歧桿菌液體培養(yǎng)基
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雙歧桿菌液體培養(yǎng)基
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雙歧桿菌瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)
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根瘤菌培養(yǎng)基
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用途:用于雙歧桿菌生化試驗(yàn)用基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
蛋白胨、胰胨提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;L-半胱氨酸為還原劑,輔助培養(yǎng)基維持厭氧環(huán)境,有利于厭氧菌的生長(zhǎng);吐溫80可促進(jìn)雙歧桿菌的生長(zhǎng)并能中和一些有毒成分;氯化鈉維持均衡的滲透壓;硫酸錳、硫酸鎂、硫酸亞鐵可提供雙歧桿菌生長(zhǎng)的微量元素;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
用法:
稱取本品18.0g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,糖類按0.5%(七葉苷0.25%)加入,混勻,分裝小試管,每管3ml,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
不同細(xì)菌在雙歧桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)特征:

雙歧桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基微生物靈敏度試驗(yàn):按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置37℃厭氧培養(yǎng)18-24小時(shí)。
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本方法適用于食品中雙歧桿菌的分離培養(yǎng)及生化特性檢測(cè),如乳制品、嬰幼兒配方食品等樣品中雙歧桿菌的計(jì)數(shù)與鑒定,依據(jù)《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 雙歧桿菌檢驗(yàn)》(GB 4789.34—2016)[3]。
采用選擇性培養(yǎng)基(如雙歧桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基)進(jìn)行厭氧培養(yǎng),通過菌落形態(tài)觀察、革蘭氏染色及生化反應(yīng)(如糖發(fā)酵試驗(yàn))鑒定雙歧桿菌屬[3][5]。
定量限為10 CFU/g(或mL),檢出限與樣品稀釋度及培養(yǎng)基選擇性相關(guān),需通過空白對(duì)照和梯度稀釋驗(yàn)證[3]。
需使用標(biāo)準(zhǔn)菌株(如雙歧桿菌ATCC 15707)作為陽性對(duì)照,平行設(shè)置空白對(duì)照和陰性對(duì)照(如大腸桿菌),確保培養(yǎng)基無菌性及選擇性[3][5]。
1. 樣品處理:無菌稱取25g樣品加入225mL生理鹽水均質(zhì);
2. 梯度稀釋:選擇2-3個(gè)稀釋度,每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿;
3. 培養(yǎng)基傾注:涼至45℃的培養(yǎng)基與稀釋液混合,凝固后倒置培養(yǎng);
4. 厭氧培養(yǎng):36±1℃厭氧環(huán)境培養(yǎng)72±3小時(shí)[3][5]。
1. 需嚴(yán)格控制厭氧條件(如使用厭氧罐或工作站);
2. 培養(yǎng)基配制后需121℃滅菌15分鐘;
3. 菌落計(jì)數(shù)需排除非目標(biāo)菌干擾,結(jié)合生化試驗(yàn)確認(rèn)[3][5]。
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