乳酸桿菌選擇性瓊脂/用于乳酸桿菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)
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2216E海水瓊脂即用型平板
BNCC353703 | 見詳情
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酵母浸粉
BNCC385214 | 見詳情
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胰蛋白胨
BNCC385213 | 見詳情
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DSMZ231培養(yǎng)基
BNCC385128 | 見詳情
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含20%蔗糖的麥芽即用型平板
BNCC380934 | 見詳情
用途:用于乳酸菌檢測(cè)和分離培養(yǎng)。
檢驗(yàn)原理:
胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、維生素、生長(zhǎng)因子;葡萄糖提供碳源;磷酸二氫鉀為緩沖劑;檸檬酸銨、硫酸鎂、硫酸錳、亞硫酸鐵、吐溫80和乙酸鈉為培養(yǎng)各種乳酸菌提供生長(zhǎng)因子,吐溫80為乳酸桿菌提供所需的代謝脂肪酸;檸檬酸銨和乙酸鈉能夠抑制一些雜菌的生長(zhǎng),包括鏈球菌、霉菌和除乳酸桿菌外的大多數(shù)口腔微生物菌群;加入乙酸,使pH值降低,抑制了其它細(xì)菌的生長(zhǎng),有利于乳酸桿菌的分離;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑。
用法:
稱取本品84.7g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,并吸取1.32ml冰乙酸混勻,加熱溶解并不停攪拌,冷至50℃左右時(shí),傾入無(wú)菌平皿,無(wú)需高壓滅菌。
乳酸桿菌選擇性瓊脂微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃需氧培養(yǎng)24-48小時(shí)。
注:回收率計(jì)算時(shí),用TSA瓊脂做對(duì)照培養(yǎng)基。
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適用于食品中乳酸菌(含乳酸桿菌屬)的分離、計(jì)數(shù)及鑒定,涵蓋乳制品、發(fā)酵食品等需進(jìn)行乳酸菌檢測(cè)的食品類別[4]。
采用MRS瓊脂作為選擇性培養(yǎng)基,通過(guò)調(diào)整pH至6.5±0.2并添加乙酸抑制雜菌,配合厭氧培養(yǎng)(37℃±1℃/72h±3h)實(shí)現(xiàn)乳酸桿菌特異性分離[4]。
定量檢測(cè)限為10 CFU/g(mL),定性檢測(cè)要求樣品中乳酸菌濃度≥100 CFU/g(mL)方可有效分離目標(biāo)菌落[4]。
需同步進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照(植物乳桿菌ATCC 8014)和陰性對(duì)照(大腸埃希氏菌ATCC 25922),陽(yáng)性菌在MRS瓊脂上應(yīng)形成直徑1-2mm的白色光滑菌落[4]。
1. 樣品均質(zhì)使用拍打式均質(zhì)儀避免破壞菌體活性
2. 梯度稀釋需在15min內(nèi)完成
3. 傾注平板時(shí)培養(yǎng)基溫度嚴(yán)格控制在46℃±1℃
4. 厭氧培養(yǎng)需使用專用發(fā)生系統(tǒng)維持氧氣濃度≤5%[4]
培養(yǎng)基開封后需在2-8℃密封保存且15日內(nèi)用完,重復(fù)加熱不得超過(guò)2次。實(shí)驗(yàn)環(huán)境需符合二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室要求,菌種鑒定須結(jié)合API 50CH生化鑒定系統(tǒng)[4]
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