M17肉湯/用于牛奶和乳制品中乳酸菌檢測(cè)和增菌培養(yǎng)
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2216E海水瓊脂即用型平板
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酵母浸粉
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胰蛋白胨
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DSMZ231培養(yǎng)基
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含20%蔗糖的麥芽即用型平板
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用途:用于牛奶和乳制品中乳酸菌檢測(cè)和增菌培養(yǎng)。
保存條件:5-25℃避光干燥處保存,開(kāi)封后建議放置于2-8℃密封保存。
成分(g/L)
檢驗(yàn)原理:
大豆胨、蛋白胨、酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、維生素和礦物質(zhì)元素;酵母浸粉提供B族維生素刺激細(xì)菌的生長(zhǎng);乳糖為可發(fā)酵糖類;抗壞血酸鈉刺激乳酸鏈球菌的生長(zhǎng);β-甘油磷酸鈉為緩沖劑;硫酸鎂提供生長(zhǎng)所必需的離子。
用法:
稱取本品42.3g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
注:培養(yǎng)基中有少量硫酸鎂,滅菌后可能出現(xiàn)微量沉淀。
M17肉湯中細(xì)菌的生長(zhǎng)特征:
在M17肉湯中乳酸鏈球菌,嗜酸乳桿菌渾濁生長(zhǎng)
M17肉湯微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置36±1℃厭氧培養(yǎng)24-72小時(shí)。
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適用于牛奶及乳制品中乳酸菌的檢測(cè)與分離培養(yǎng),尤其適用于需高靈敏度檢測(cè)的商業(yè)化乳品質(zhì)量控制[2][5]。
采用肉湯增菌培養(yǎng)法結(jié)合后續(xù)分離鑒定步驟。具體流程包括樣品前處理、選擇性增菌培養(yǎng)(M17肉湯)、瓊脂平板分離及生化鑒定[2][5]。
理論檢出限為1 CFU/10ml,定量限為10 CFU/ml。實(shí)際靈敏度受樣品基質(zhì)干擾影響需通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)菌株驗(yàn)證[2][5]。
需同步使用標(biāo)準(zhǔn)菌株(如嗜熱鏈球菌ATCC 19258)進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照,陰性對(duì)照采用滅菌生理鹽水。每批次培養(yǎng)基需驗(yàn)證β-甘油磷酸鈉有效性[2][5]。
1. 稱取42.25g培養(yǎng)基溶解于1L純水
2. 121℃高壓滅菌15分鐘后冷卻至45℃
3. 無(wú)菌條件下分裝至滅菌容器
4. 接種樣品后37℃培養(yǎng)18-24小時(shí)[2][5]
1. 含β-甘油磷酸鈉成分需避光保存,開(kāi)封后需在干燥器內(nèi)存放
2. 出現(xiàn)結(jié)塊或顏色異常應(yīng)停止使用
3. 增菌培養(yǎng)后需在4小時(shí)內(nèi)轉(zhuǎn)種至固體培養(yǎng)基[2][5]
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