稀釋液(GB4789.35-2023)/用于乳酸菌檢驗(yàn)中樣品的稀釋液
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2216E海水瓊脂即用型平板
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酵母浸粉
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胰蛋白胨
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DSMZ231培養(yǎng)基
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含20%蔗糖的麥芽即用型平板
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用途:用于乳酸菌檢驗(yàn)中樣品的稀釋液。
成分(g/L)
用法:
稱取本品23.5g,加熱溶解于1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。
稀釋液微生物靈敏度試驗(yàn):
按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置25℃需氧培養(yǎng)15分鐘。
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2. 實(shí)時(shí)熒光PCR方法(選做方法):基于特異性基因片段進(jìn)行快速檢測(cè),作為傳統(tǒng)方法的補(bǔ)充。
2. 實(shí)時(shí)熒光PCR法:檢出限為100 CFU/g(或mL),定量限為103 CFU/g(或mL)。
2. 陰性對(duì)照:無菌稀釋液或未接種培養(yǎng)基作為空白對(duì)照。
3. 平行試驗(yàn):每個(gè)稀釋度至少接種2個(gè)平板。
2. 接種與培養(yǎng):選擇1~3個(gè)稀釋度,接種MRS瓊脂(乳桿菌/雙歧桿菌)和MC瓊脂(嗜熱鏈球菌),36℃±1℃厭氧/需氧培養(yǎng)48~72小時(shí)。
3. 結(jié)果判讀:菌落形態(tài)觀察結(jié)合生化鑒定(如觸酶試驗(yàn)、革蘭氏染色)。
2. 乳酸菌定義更新:明確生化特性(如無芽孢、觸酶陰性)。
3. 培養(yǎng)時(shí)間調(diào)整:部分菌屬培養(yǎng)時(shí)間從48小時(shí)延長(zhǎng)至72小時(shí)以提高檢出率。
4. 質(zhì)控要求:需定期驗(yàn)證培養(yǎng)基選擇性和設(shè)備性能(如恒溫培養(yǎng)箱溫度穩(wěn)定性)。
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