尿素酶/用于沙門氏菌和志賀氏菌、霍亂弧菌、致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定
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用途:用于沙門氏菌和志賀氏菌、霍亂弧菌、致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定。
試驗原理:
有些細菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解、產(chǎn)生2個分子的氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅呈粉紅色。尿素酶不是誘導(dǎo)酶,因為不論底物尿素是否存在,細菌均能合成此酶。其活性最適ph為7.0。
結(jié)果判斷:
編號
產(chǎn)品名稱
結(jié)果判斷
培養(yǎng)時間
備注
陽性
陰性
GS004
尿素酶
變玫紅色
不變色或黃色
18-24
尿素酶中細菌的生長特征:
在尿素酶生化管中,霍亂弧菌、福氏志賀氏菌、鼠傷寒沙門氏菌、大腸埃希氏菌生長良好,培養(yǎng)基變黃色;
普通變形桿菌生長良好,培養(yǎng)基變桃紅色
尿素酶微生物靈敏度試驗:
接種以下質(zhì)控菌株,放置37±1℃需氧培養(yǎng)24±3小時。
以上信息僅供參考,請以實物批次為準!
本公司銷售的所有產(chǎn)品僅供實驗科研使用,不用于人體及臨床診斷。
本標準適用于大豆、由大豆制得的產(chǎn)品和副產(chǎn)品中尿素酶活性的測定,用于評估大豆制品加工過程中加熱程度的控制及其營養(yǎng)價值[2][6]。
采用尿素分解產(chǎn)物的pH變化法:樣品與尿素溶液反應(yīng)后,通過測定反應(yīng)體系pH值的變化速率,計算尿素酶活性。反應(yīng)終止后需立即測定,避免誤差[2][6]。
檢出限為0.02 U/g,定量限為0.05 U/g。活性低于0.05 U/g時需重復(fù)測定以確保準確性[2][6]。
需使用已知尿素酶活性的標準大豆樣品作為質(zhì)控對照,每批次檢測至少包含1個質(zhì)控樣,偏差需控制在±10%以內(nèi)[2][6]。
1. 樣品粉碎至60目以下,確保均一性;
2. 精確稱取1.00g樣品與5ml尿素溶液混合;
3. 30℃水浴反應(yīng)30分鐘;
4. 立即加入0.1mol/L鹽酸終止反應(yīng);
5. 測定反應(yīng)液pH值并計算活性值[2][6]。
1. 實驗用水需符合GB/T 6682三級水標準;
2. 檢測環(huán)境溫度需控制在25±2℃,避免酶活性波動;
3. 結(jié)果判定時需結(jié)合樣品實際加工工藝,活性值0.05~0.2 U/g視為加工適度范圍[2][6]。
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